人α-輔肌動蛋白3（ACTN-3）ELISA試劑盒說明書

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中文名：人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒
別名：人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA Kit
貨號：fk-0058
供應商：上海樊克
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8℃
有效期：6個月
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。
用途：科研實驗等領域科研研究，不得用于臨床診斷。


人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒說明書本試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響zui后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。


我司ELISA試劑盒具有以下特點：

1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。

4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。

5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應用酶免吸附技術進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術的定量測定。

6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術都能在較短時間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置。


人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒說明書本試劑盒操作步驟：
1. 每孔分別加入已稀釋的樣品、標準品各100ul。
2. 將板置于37℃溫育30分鐘。
3. 甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。
4. 每孔加入酶標偶合液100ul。
5. 將板置于37℃溫育30分鐘。
6. 甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。
7. 每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應15分鐘。
8．每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。


人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

洗板方法：
  1.手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復此過程數(shù)次。
  2.自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

實驗備注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及終止液。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。

3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。

4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。

5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。


人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA檢測試劑盒注意事項：
1）試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

7）底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

8）加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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