詳細(xì)介紹
PCR前的核酸提取過(guò)程操作復(fù)雜,耗時(shí)、好禮,難以實(shí)現(xiàn)高通量操作,且易造成實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。本公司給予*的Direct Lysis試劑,開發(fā)了組織細(xì)胞直接擴(kuò)增技術(shù),可不用提取核酸,對(duì)組織或細(xì)胞樣本簡(jiǎn)單處理后,直接進(jìn)行PCR、RT-PCR、qPCR以及RT-PCR。該系列試劑盒可廣泛應(yīng)用于基因克隆、轉(zhuǎn)基因或基因敲除鑒定、基因表達(dá)分析、病毒診斷等PCR相關(guān)的各種實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
低樣本量:樣品用量小,20-40ul即可滿足需求
快捷:30min內(nèi)制備模板,無(wú)需其他設(shè)備
高效:經(jīng)反復(fù)驗(yàn)證,可有效擴(kuò)增組織細(xì)胞中長(zhǎng)達(dá)1800bp的DNA和RNA的片段
直接:無(wú)需柱純化、步驟簡(jiǎn)單,降低氣溶膠產(chǎn)生
高通量:能夠在96孔板或8聯(lián)管中操作
RNA direct:RNA也可進(jìn)行直接擴(kuò)增,同類產(chǎn)品少,且對(duì)比競(jìng)品效果優(yōu)
產(chǎn)品名稱:EZ010細(xì)胞及動(dòng)物組織DNA直擴(kuò)PCR試劑盒
英文名稱:EZ Cell and Tissue DNA Direct PCR Kit
產(chǎn)品貨號(hào):EZ010-01/EZ010-02
產(chǎn)品規(guī)格:50T/200T
產(chǎn)品價(jià)格:420/1350元
試劑盒應(yīng)用:
動(dòng)物組織或細(xì)胞DNA的擴(kuò)增與克隆、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞株篩選、DNA病毒基因擴(kuò)增、DNA病毒普通PCR診斷、DNA病毒Real-time PCR診斷(Taqman法)等。
試劑盒組成:
DNA-EZ-1、DNA-EZ-2、DNA-EZ-3、2×TaqMix、H2O
保存條件:
-20ºC保存。使用前將DNA-EZ-1、DNA-EZ-3在室溫或37ºC充分溶解。DNA-EZ-2和2×TaqMix需置于冰上。
EZ010細(xì)胞及動(dòng)物組織DNA直擴(kuò)PCR試劑盒使用方法:
1、細(xì)胞或組織樣品中DNA的擴(kuò)增
1 將DNA-EZ-1與DNA-EZ-2以5:1的比例充分混合。
2 取20 µL細(xì)胞樣品(105-106 cells/mL)或研磨的組織樣品,加入6 µL上述混合液,混勻。
3 置于50ºC靜置10分鐘后,再置于95ºC加熱10分鐘。
4 加入50 μL的DNA-EZ-3,混勻。
5 取2 μL上述處理液進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
2、組織塊中DNA的擴(kuò)增
1 用H2O將DNA-EZ-1稀釋5倍,每25 μL的DNA-EZ-1稀釋液加入1 μL的DNA-EZ-2,混合均勻。
2 切取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),并*浸入上述混合液中。
3 50ºC加熱30分鐘,每隔10分鐘取出混勻一次。
4 95ºC加熱10分鐘。
5 加入50 μL的DNA-EZ-3,混勻。
6 取2 μL上述處理液進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
3、Real-time PCR
取上述細(xì)胞或組織處理液,加入特異性引物和Taqman探針,可進(jìn)行特異性靶標(biāo)DNA的定量檢測(cè)。
取上述細(xì)胞或組織處理液,加入SYBR Green PCR試劑(需自備),可進(jìn)行特異性靶標(biāo)DNA的相對(duì)定量檢測(cè)。
4、PCR加樣體系
成分 | 25 μL體系(*) | 50 μL體系 |
2×TaqMix | 12.5 μL | 25 μL |
Forward Primer (10 μM) | 1 μL | 2 μL |
Reverse Primer (10 μM) | 1 μL | 2 μL |
Template DNA | 2 μL | 2 μL |
H2O | 8.5 μL | 19 μL |