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詳細(xì)介紹
Allsheng恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（以RNA為模板）是一種即用型的恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒，本試劑盒包含建立恒溫反應(yīng)體系（除引物和模板之外）的所有組分。本產(chǎn)品專為以RNA模板（如RNA病毒）的恒溫PCR檢測而設(shè)計(jì)。使用基因特異引物，逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)在一管內(nèi)完成，不需要額外開管/移液操作，大大提高了檢測通量，并降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。
交叉引物擴(kuò)增技術(shù)（CPA）介紹
恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)是繼PCR技術(shù)后發(fā)展起來的一門新型的核酸擴(kuò)增技術(shù)（Nucleic Acid Isothermal Amplification， NAIA），其擴(kuò)增反應(yīng)的全過程均在同一溫度下進(jìn)行。
與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比，使得他們對(duì)擴(kuò)增所需儀器的要求大大簡化，反應(yīng)時(shí)間大大縮短，因而具有巨大的應(yīng)用價(jià)值，成為分子診斷行業(yè)發(fā)展的熱點(diǎn)。
CPA擴(kuò)增主要包含以下幾個(gè)步驟：
1. 交叉正向引物CPF中的PFs與模板DNA中PFa互補(bǔ)，啟動(dòng)DNA合成，使得PRa被引入到所擴(kuò)增的產(chǎn)物中；
2. 外圍引物DP1s與PFa前端DP1a序列互補(bǔ)，通過鏈置換型DNA聚合酶向前延伸，一邊置換CPF合成的能與CPR和DP2a結(jié)合的單鏈產(chǎn)物（結(jié)構(gòu)3），一邊與模板DNA形成雙鏈產(chǎn)物（結(jié)構(gòu)2）；
3. 在結(jié)構(gòu)3中，DP2a通過鏈置換型DNA聚合酶向前延伸，置換出由CPR所延伸的單鏈產(chǎn)物（結(jié)構(gòu)5），同時(shí)合成與步驟2中由CPF延伸所產(chǎn)生單鏈DNA形成雙鏈產(chǎn)物（結(jié)構(gòu)4）,而結(jié)構(gòu)5相對(duì)起始的DNA模板，多了PRs和PFs兩個(gè)片段序列；
4. 單鏈結(jié)構(gòu)5中的3’端的PFa和PRs可分別與CPF中的PFs和CPR中的PRa互補(bǔ)結(jié)合， 可在鏈置換型DNA聚合酶的作用下延伸和置換出相應(yīng)的單鏈產(chǎn)物。延伸產(chǎn)物相對(duì)結(jié)構(gòu)5來說又增加了一個(gè)PFs區(qū)域（結(jié)構(gòu)8）；
5. 因此，擴(kuò)增引物CPF和CPR的不斷雜交和延伸，不僅使得結(jié)構(gòu)5的長度不斷的加長,從而引入更多CPF和CPR 3’端互補(bǔ)區(qū)域，同時(shí)也置換出了各種可與CPF和CPR 3’端互補(bǔ)的單鏈產(chǎn)物；
6. 通過CPF和CPR的不斷雜交延伸和DNA聚合酶的鏈置換作用，使得DNA拷貝數(shù)不斷的增加，從而達(dá)到基因擴(kuò)增的效果。
應(yīng)用
這種新型的核酸恒溫?cái)U(kuò)增方法，其廣泛應(yīng)用于RNA病毒的快速檢測。
特點(diǎn)
逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增在同一管內(nèi)進(jìn)行，避免污染。靈敏度高，反應(yīng)設(shè)備及檢測設(shè)備價(jià)格低廉等廣受科研工作者的親睞，是未來檢測技術(shù)發(fā)展的趨勢。
使用說明
請(qǐng)?jiān)斠娬f明書
| 訂貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 |
| RS-IA0201-24T | Allsheng® 恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（RNA模板） 24次 |
| RS-IA0201-48T | Allsheng® 恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（RNA模板） 48次 |
| RS-IA0201-96T | Allsheng® 恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（RNA模板） 96次 |
| RS-FD0201-24T | Allsheng® 恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（RNA模板、凍干粉）24次 |
| RS-FD0201-48T | Allsheng® 恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（RNA模板、凍干粉）48次 |
| RS-FD0201-96T | Allsheng® 恒溫?cái)U(kuò)增PCR Master Mix（RNA模板、凍干粉）96次 |
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