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人β-防御素2（HBD-2）elisa試劑盒

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更新時(shí)間：2020-04-26 13:20:07瀏覽次數(shù)：436次

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廈門侖昌碩生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

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人β-防御素1（human defensin-β-1,HBD-1）由上皮細(xì)胞分泌,在腫瘤細(xì)胞中極少表達(dá),研究表明它可作為腫瘤的抑制基因.本研究制備以人表皮生長因子受體-1（human epidermal growth factor receptor-1,EGFR-1）為靶點(diǎn)、HBD-1（Db）的力達(dá)霉素（lidamycin,LDM）組成的強(qiáng)化融合蛋白Ec-LDP（AE）-Db,并探討其抗腫瘤

詳細(xì)介紹

人β-防御素1(human defensin-β-1,HBD-1)由上皮細(xì)胞分泌,在腫瘤細(xì)胞中極少表達(dá),研究表明它可作為腫瘤的抑制基因.本研究制備以人表皮生長因子受體-1(human epidermal growth factor receptor-1,EGFR-1)為靶點(diǎn)、HBD-1(Db)的力達(dá)霉素(lidamycin,LDM)組成的強(qiáng)化融合蛋白Ec-LDP(AE)-Db,并探討其抗腫瘤活性.方法采用基因工程方法制備融合蛋白基因并將其表達(dá)純化得到融合蛋白Ec-LDP-Db.ELISA和細(xì)胞免疫熒光法檢測Ec-LDP-Db與腫瘤細(xì)胞表面EGFR親和活性;采用CCK-8法測定Ec-LDP-Db對人腫瘤細(xì)胞A431、A549、H460和PG-BE1體外殺傷活性,純化的Ec-LDP-Db蛋白與LDM發(fā)色團(tuán)(AE)在體外進(jìn)行組裝,構(gòu)建強(qiáng)化融合蛋白Ec-LDP(AE)-Db.采用MTT法檢測Ec-LDP(AE)-Db對腫瘤細(xì)胞殺傷活性,A431細(xì)胞裸鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)檢測Ec-LDP(AE)-Db體內(nèi)抗腫瘤活性.流式細(xì)胞儀檢測Ec-LDP(AE)-Db作用后腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期變化.結(jié)果成功構(gòu)建并表達(dá)融合蛋白Ec-LDP-Db,目的蛋白主要以包涵體的形式存在,目的蛋白Ec-LDP-Db經(jīng)純化、復(fù)性后,每升發(fā)酵液可以獲得30 mg,檢測純度達(dá)到88％.Ec-LDP-Db可與高表達(dá)EGFR的A431細(xì)胞表面結(jié)合.不同濃度的HBD-1和Ec-LDP-Db對A431和H460具有增殖抑制作用,其中10μmol/L Ec-LDP-Db組A431細(xì)胞抑制率為(67.3±6.9)％,高于HBD-1組抑制率