詳細(xì)介紹
斑馬魚評(píng)價(jià)胃腸道粘膜損傷輔助保護(hù)功效【評(píng)價(jià)原理】
近年來(lái),各種各樣的美食迫使人們?cè)絹?lái)越關(guān)注胃腸道健康問(wèn)題。斑馬魚的基因與人類基因的相似度達(dá)到87%,并擁有與人類結(jié)構(gòu)和功能相似的胃腸道組織。斑馬魚胃腸道粘膜屏障系統(tǒng)由較完整的機(jī)械屏障、化學(xué)屏障和免疫屏障構(gòu)成,與哺乳動(dòng)物高度相似,可作為胃腸道粘膜屏障研究的動(dòng)物模型。三硝基苯磺酸(TNBS)可破壞胃腸粘膜屏障,與腸組織蛋白結(jié)合形成抗原,發(fā)生反應(yīng),誘發(fā)潰瘍性胃腸道損傷。胃腸道病變累及肌層和神經(jīng),導(dǎo)致胃腸壁張力減退,胃腸腔擴(kuò)大。胃腸道病變時(shí)出現(xiàn)炎癥反應(yīng),中性粒細(xì)胞募集到損傷部位。杯狀細(xì)胞主要分泌黏蛋白,形成黏膜屏障以保護(hù)上皮細(xì)胞,胃腸黏膜損傷時(shí)杯狀細(xì)胞數(shù)量減少。通過(guò)病理切片可觀察胃腸道組織學(xué)改變(如潰瘍形成等)的情況。
我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚胃腸道粘膜損傷輔助保護(hù)功效有4個(gè)指標(biāo):1. 觀察胃腸腔面積;2. 應(yīng)用轉(zhuǎn)基因中性粒細(xì)胞綠色熒光斑馬魚,觀察胃腸道中性粒細(xì)胞數(shù)量;3. 應(yīng)用特異性的染料(呈藍(lán)色),觀察腸道杯狀細(xì)胞數(shù)目;4. 胃腸道病理切片。
斑馬魚評(píng)價(jià)胃腸道粘膜損傷輔助保護(hù)功效【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未經(jīng)任何處理,模型對(duì)照組與服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組都攝入了等量的TNBS(TNBS通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組在TNBS誘導(dǎo)胃腸道粘膜損傷之后攝入常欣衛(wèi)口服液之類的胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑。
服用一段時(shí)間胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑后,我們觀察斑馬魚胃腸道表型,分析胃腸腔面積,胃腸道中性粒細(xì)胞數(shù)目和杯狀細(xì)胞數(shù)目,同時(shí)制作成病理切片觀察胃腸道的病理結(jié)構(gòu)變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚胃腸道表型圖(藍(lán)色虛線區(qū)域?yàn)槲改c腔)
可以看到,服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)組的胃腸腔面積與正常對(duì)照組比較相似,沒(méi)有明顯的胃腸腔擴(kuò)張。
圖2. 斑馬魚胃腸道中性粒細(xì)胞表型圖(黃色虛線區(qū)域?yàn)槟c腔)
可以看到,服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組的腸道中性粒細(xì)胞數(shù)量與正常對(duì)照組比較相似,沒(méi)有明顯的增多。
圖3. 斑馬魚胃腸道杯狀細(xì)胞表型圖
可以看到,服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組的腸道杯狀細(xì)胞數(shù)量與正常對(duì)照組比較相似,沒(méi)有明顯的減少。
圖4. 斑馬魚胃腸道病理切片
可以看到,服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組的胃腸粘膜形態(tài)與正常對(duì)照組比較相似,沒(méi)有明顯的胃腸腔擴(kuò)張、粘膜糜爛潰瘍等癥狀。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過(guò)每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用胃腸道粘膜輔助保護(hù)劑組的胃腸腔情況與正常對(duì)照組相似,并未出現(xiàn)模型對(duì)照組胃腸腔擴(kuò)張、中性粒細(xì)胞數(shù)量增加、腸道杯狀細(xì)胞數(shù)目減少、粘膜糜爛潰瘍等情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了常欣衛(wèi)口服液具有明顯胃腸道粘膜輔助保護(hù)功效。