魚(yú)粉是一種重要的蛋白質(zhì)原料，其安全性問(wèn)題不能忽略，安全重要體現(xiàn)在是否有藥物殘留、是否有毒物質(zhì)殘留等，具體可操作的檢測(cè)指標(biāo)包括魚(yú)粉的新鮮度、藥物殘留和衛(wèi)生指標(biāo)等。魚(yú)粉的新鮮度差，會(huì)嚴(yán)重降低魚(yú)粉是品質(zhì)，甚至喪失飼用價(jià)值。本文著重討論其中的一項(xiàng)鑒定指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)應(yīng)用，以揮發(fā)性鹽基氮含量表示。

　　揮發(fā)性鹽基氮是指動(dòng)物性食物由于酶和細(xì)菌的作用，在腐敗過(guò)程中，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類(lèi)含氮物質(zhì)，此類(lèi)物質(zhì)具有揮發(fā)性，在堿性溶液中蒸出后，用標(biāo)準(zhǔn)酸液滴定從而計(jì)算含量，根據(jù)此原理，在半微量檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上改良，使檢測(cè)更簡(jiǎn)易、快捷。

　　1、試劑

　　1.1 1%氧化鎂混懸液 分析純氧化鎂1.0g溶于100ml蒸餾水中，振搖成混懸液。

　　1.2 2%硼酸吸收液 分析純硼酸2g溶于100ml蒸餾水。

　　1.3 0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液 吸取分析純鹽酸8.3ml，用蒸餾水定容至1000ml，用無(wú)水碳酸鈉標(biāo)定。

　　1.4 0.01ml/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液 用0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋。

　　1.5 混合指示劑 甲基紅0.1%乙醇溶液，溴甲酚綠0.5%乙醇溶液，兩溶液等體積混合，陰涼處保存三個(gè)月以?xún)?nèi)。

　　二。實(shí)驗(yàn)所用到的儀器

　　2.1 上海梅穎浦磁力攪拌器

　　2.2 型定氮儀

　　2.3 離心機(jī)

　　2.4 消化管

　　2.5 滴定管 zui小分度0.01ml

　　3、分析步驟

　　3.1 樣品處理

　　取10g魚(yú)粉于250ml錐形瓶中，加100ml(V總)蒸餾水，于磁力攪拌器上攪拌30min，4000轉(zhuǎn)離心。

　　3.2 蒸餾滴定

　　吸取20.0ml2%硼酸吸收液于錐形瓶中，加混合指示劑2~3滴，使KDN-2C型定氮儀的冷凝管末端浸入此溶液。準(zhǔn)確吸取10.0ml(V分)上述樣品清夜于消化管中，加少量蒸餾水沖洗，再加入10ml1%的氧化鎂溶液，蒸餾至150ml(約5min)。吸收液立即用0.01mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色為終點(diǎn)，同時(shí)做試劑空白。

　　4、計(jì)算

　　揮發(fā)性鹽基氮(W)以每100g樣品含氮毫克數(shù)表示。

　　W—樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量，mg/100g

　　V1—測(cè)定試樣所消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，ml

　　V2—試劑空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,ml

　　C—鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的實(shí)際濃度，mol/L

　　14—與1.00mL標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量，mg

　　m—樣品質(zhì)量，g

　　結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)平均值的三位有效數(shù)。

　　5、允許差

　　相對(duì)誤差≤10%。

　　6、影響因素

　　6.1 時(shí)間

　　VBN的檢測(cè)反映的是魚(yú)粉的腐敗過(guò)程所產(chǎn)生的氨以及胺類(lèi)等堿性含氮物質(zhì)，因此，離心后的樣液應(yīng)馬上檢測(cè)。作者以粗蛋白含量為65%的進(jìn)口秘魯魚(yú)粉為例，對(duì)比時(shí)間對(duì)VBN的影響(見(jiàn)表1)。

　　表1 時(shí)間對(duì)VBN的影響

　　時(shí)間 VBN(mg/100g)

　　2h 175

　　1h 158

　　0.5h 133

　　10min 112

　　5min 106

　　3min 105

　　以上表明，試液應(yīng)在5min以?xún)?nèi)進(jìn)行測(cè)定。

　　6.2 溫度

　　磁力攪拌過(guò)程也要維持一定的溫度，溫度越高，VBN越大，檢驗(yàn)的誤差越大。

　　表2 溫度對(duì)VBN的影響

　　溫度 VBN(mg/100g)

　　20℃ 105

　　25℃ 108

　　30℃ 122

　　32℃ 154

　　以上表明，磁力攪拌中控制溫度在20~25℃*。

　　7、其他

　　7.1 魚(yú)粉執(zhí)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(魚(yú)粉GB T19164-2003)的主要技術(shù)參數(shù)(表3)

　　表3 魚(yú)粉GB T19164-2003

　　項(xiàng)目 指標(biāo)

　　特級(jí)品 一級(jí)品 二級(jí)品 三級(jí)品

　　粗蛋白(%) ≥65 ≥60 ≥55 ≥50

　　揮發(fā)性鹽基氮VBN(mg/100g) ≤110 ≤130 ≤150 ≤150

　　7.2 本檢測(cè)方法可推廣應(yīng)用至其他的動(dòng)物性蛋白飼料，例如血漿蛋白、血球蛋白等等。