齊一生物人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA檢測試劑盒 齊一生物科技(上海)有限公司試劑種類眾多:覆蓋分析化學(xué)品,無機(jī)化學(xué)品,有機(jī)化學(xué)品,生物化學(xué)品,材料化學(xué)品.試劑信息齊全:包含試劑特性描述,詳細(xì)質(zhì)量信息,應(yīng)用方法、標(biāo)準(zhǔn),用途以及正在開發(fā)的前沿應(yīng)用.齊一生物科技(上海)有限公司: 60348496.www.qiyibio。。com
齊一生物人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA檢測試劑盒7 工作液準(zhǔn)備
7.1 AFB1標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ng/ml,0.1ng/ml ,0.3 ng/ml,0.9 ng/ml,2.7 ng/ml,8.1ng/ml
7.2 濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用
7.3 樣本稀釋液:用蒸餾水按1:10(1+9)稀釋備用
7.3 顯色劑:已備用,避免光線直照
7.4 反應(yīng)終止液:已備用
8 樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
8.1取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
8.2強(qiáng)力振蕩3分鐘
8.3用Whatman 濾紙過濾
8.4取100μl處理后的樣品,加入400μl樣本稀釋液
8.5取50μl稀釋液進(jìn)行分析(稀釋倍數(shù)10)
9 酶免分析步驟
9.1 實(shí)驗(yàn)須知
9.1.1 實(shí)驗(yàn)開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)室溫(25±2℃),時間約2小時?;販厥覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準(zhǔn)確度。
9.1.2 使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
9.1.3 請不要改變分析程序
9.1.4 請使用精確的微量移液器
9.1.5 操作一旦開始,請不要中斷任何程序
9.1.6 ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請嚴(yán)格按照要求操作
9.1.7 為避免交叉污染,每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
9.1.8 加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
9.2 分析步驟
9.2.1 預(yù)先進(jìn)行編號,標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測
9.2.2 取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3 樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
9.2.4 在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
9.2.5 在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
9.2.6 在各樣品孔中加入50μl樣品溶液
9.2.7 在所有孔中加入50μl的抗本產(chǎn)品抗體酶結(jié)合物
9.2.8 輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。
9.3 37℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)
9.3.1 甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
9.4 反應(yīng)
9.4.1 洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50μl顯色液A,再加 50μl顯色液B;輕微晃動反應(yīng)板使之*混勻
9.4.2 37℃溫浴10min
9.4.3 每孔中加入50μl終止液,混勻
9.4.4 在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。
10 結(jié)果計(jì)算
10.1定量分析
10.1.1所獲得的每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0—0 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
10.1.2以本產(chǎn)品濃度的對數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應(yīng)點(diǎn)的橫坐標(biāo),即為AFB1濃度的對數(shù)值,求得反對數(shù)即為測定液中AFB1濃度C(ng/ml)
10.1.3由于樣品經(jīng)過了預(yù)先稀釋,因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。
10.2 半定量測定
10.1.1目測半定量測定:首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。
10.1.2儀器半定量測定:首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。
551001 MS CD19 PERCP-CY5.5 MAB 0.1MG 1D3
551008 SAV-AKP PRE-DILUTED 50ML
551011 MS IG HRP DTEC KIT
551012 HAMSTER IG HRP DTEC KIT
551013 ANTI-RAT IG HRP DTEC KIT
551015 AEC SBSTR KIT 500TST
551017 MS IL-4 BD ELISPOT SET 10PLT
551018 HU IL-10 BD ELISPOT SET 10PLT
551019 RAT IG APC PAB 0.1MG POLY1271
551020 BCL-X PURE MAB W/CONT 50UG 2H12
551022 BCL-X PURE MAB W/CONT 150UG 2H12
551024 HU PARP PURE MAB W/CONT 50UG 7D3-6
551025 HU PARP PURE MAB W/CONT 150UG 7D3-6
551033 HU CD247 PURE MAB W/CONT 50UG 8D3
551034 HU CD247 PURE MAB W/CONT 150UG 8D3
551035 HU IRF3 PURE MAB W/CONT 50UG SL-14.2
551041 RIP PURE MAB W/CONT 50UG G322-2
551042 HU RIP PURE MAB W/CONT 150UG G322-2
551047 HU P56LCK PURE MAB W/CONT 50UG MOL171
551048 HU P56LCK PURE MAB W/CONT 150UG MOL171
551051 HU BCL-2 PURE MAB W/CONT 50UG 6C8
551052 HU BCL-2 PURE MAB W/CONT 150UG 6C8
551053 HU CD85J PE MAB 100TST GHI/75
551054 HU CD85J PE-CY5 MAB 100TST GHI/75
551055 HU CMRF-44 PURE MAB 0.1MG CMRF-44
551056 HU PRR2 PURE MAB 0.1MG R2.525
551057 HU PRR2 PE MAB 100TST R2.525
551058 HU CD83 PE-CY5 MAB 100TST HB15E
551059 HU ITGRN BTA 7 PE-CY5 MAB 100TST FIB504
551060 HU CD18 APC MAB 100TST 6.7
551061 HU CD42B APC MAB 100TST HIP1
551062 HU IGM APC MAB 100TST G20-127
551063 HU CD79B PE-CY5 MAB 100TST CB3-1
551064 HU CD21 PE-CY5 MAB 100TST B-LY4
551065 HU CD123 PE-CY5 MAB 100TST 9F5
551066 RAT IGG2A KPA ITCL PE-CY5 100TST R35-95
551071 MS CD25 PERCP-CY5.5 MAB 0.1MG PC61
551072 RAT IGG1 ITCL PERCP-CY5.5 0.1MG A110-1
551073 HU CD83 APC MAB 100TST HB15E
551074 MS IGG2A ITCL BIOTIN MAB 0.25MG G155-178
551075 MS IL-5 BD ELISPOT SET 10PLT
551076 MS IL-2 BD ELISPOT SET 10PLT
551077 HU CD11C PE-CY5 MAB 100TST B-LY6
551079 HU IGM PE-CY5 MAB 100TST G20-127
551080 HU CD181 APC MAB 100TST 5A12
551081 HU CD181 PE-CY5 MAB 100TST 5A12
551082 HU ITGRN BTA 7 APC MAB 100TST FIB504
551083 MS IFN-GMA BD ELISPOT SET 10PLT
551084 HU IL-4 BD ELISPOT SET 10PLT
551085 HU IL-5 BD ELISPOT SET 10PLT
551086 MS IGAB PURE MAB 0.5MG HIS-M2
551087 HU CDW93 (C1QRP) PURE MAB 0.1MG R139
551089 HU BTA 2 MICROGLOBULIN RECOM 0.1MG
551091 MLH-1 PURE MAB W/CONT 50UG G168-15
551092 MLH-1 PURE MAB W/CONT 150UG G168-15
551093 HU CASP-2 PURE MAB W/CONT 50UG G310-1248
551097 HU BCL-2 PURE MAB W/CONT 50UG 4D7
551098 HU BCL-2 PURE MAB W/CONT 150UG 4D7
551101 HU C-MYC PURE MAB W/CONT 50UG 9E10
551102 HU C-MYC PURE MAB W/CONT 150UG 9E10
551107 HU BCL-2 PURE MAB W/CONT 50UG BCL-2/100
551108 HU CD81 FITC MAB 100TST JS-81
551109 HU BCL-2 PURE MAB W/CONT 150UG BCL-2/100
551112 HU CD81 APC MAB 100TST JS-81
551113 MS CD69 PERCP-CY5.5 MAB 0.1MG H1.2F3
551114 MS NK-1.1 PERCP-CY5.5 MAB 0.1MG PK136
551116 HU IL-12 P40 OPTEIA KIT II 2PLT
551120 HU CCR4 PE MAB 0.2MG 1G1
551121 HU CCR4 PURE MAB 0.1MG 1G1
551123 RAT CD73 PURE MAB 0.1MG 5F/B9
551125 HU CD182 PE-CY5 MAB 100TST 6C6
551126 HU CD182 FITC MAB 100TST 6C6
551127 HU CD182 APC 100TST 6C6
551128 HU CD183 PE-CY5 MAB 100TST 1C6/CXCR3
551129 HU CD49F PE-CY5 MAB 100TST GOH3
551130 HU IP-10 RECOM 10UG
551131 HU CD11A PE-CY5 MAB 100TST HI111
551133 RAT CD24 PURE MAB 0.1MG HIS50
551134 HU CD79A APC MAB 100TST HM47
551135 HU CD206 FITC MAB 100TST 19.2
551136 HU CD206 PE-CY5 MAB 100TST 19.2
551137 HU CD137 PE-CY5 MAB 100TST 4B4-1
551138 HU CD161 PE-CY5 MAB 100TST DX12
551139 RAT IGG2A KPA ITCL APC MAB 100TST R35-95
551141 HU CD42B PE-CY5 MAB 100TST HIP1
551142 HU CD62P PE-CY5 MAB 100TST AK-4
551143 HU CD71 PE-CY5 MAB 100TST M-A712
551144 HU CD62E APC MAB 100TST 68-5H11
551145 HU CD62E PE MAB 100TST 68-5H11
551146 HU CD106 FITC MAB 100TST 51-10C9
551147 HU CD106 APC MAB 100TST 51-10C9
551148 HU CD106 PE-CY5 MAB 100TST 51-10C9
551153 HU P16 PURE MAB W/CONT 50UG G175-405
551154 HU P16 PURE MAB W/CONT 150UG G175-405
551159 HU CYCLIN E PURE MAB W/CONT 50UG HE12
551160 HU CYCLIN E PURE MAB W/CONT 150UG HE12
551162 MS CD8A PERCP-CY5.5 MAB 0.1MG 53-6.7
551163 MS CD3E PERCP-CY5.5 MAB 0.1MG 145-2C11
551178 HU ORC-2 PURE MAB W/CONT 50UG 920-4-41
551179 HU ORC-2 PURE MAB W/CONT 150UG 920-4-41
551186 HU CD209 PURE MAB 0.1MG DCN46
551187 MS CD51 PE MAB 0.1MG RMV-7
551188 HU HSP70/HSC70 PURE MAB W/CONT 50UG W27
551196 HU JNK1 PURE MAB W/CONT 50UG G151-333