黃熱病毒IgM抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
使用說明書
[產(chǎn)品名稱]
通用名稱：黃熱病毒IgM抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Diagnostic Kit for Yellow fever virus IgM antibody（ELISA）
[包裝規(guī)格]
96人份/盒
[用途]
黃熱病毒（YFV）IgM抗體診斷試劑盒適用于定性測定人血清或血漿中黃熱病毒IgM抗體，可作為黃熱病毒早期感染的臨床診斷指標(biāo)之一。
[檢驗原理]
本試劑盒采用雙抗體夾心法，在預(yù)包被鼠源單抗-黃熱病毒特異性抗原復(fù)合物的反應(yīng)孔內(nèi)加入待測標(biāo)本，若標(biāo)本中有抗CHIV，則可在微孔板表面形成抗原-抗體復(fù)合物，再與酶標(biāo)二抗結(jié)合，形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物，經(jīng)顯色系統(tǒng)顯色后，根據(jù)OD值判定有無YFV抗體的存在。
[試劑盒組成]
- 預(yù)包被反應(yīng)板 96孔×1塊
- 酶結(jié)合物 6ml×1瓶
- YFV陰性對照 0.5ml×1瓶
- YFV陽性對照 0.5ml×1瓶
- 濃縮洗滌液 30ml×1瓶
- 樣品稀釋液 30ml×1瓶
- 顯色劑A、B液 各6ml×1瓶
- 終止液（2M H2SO4） 5ml×1瓶
- 說明書 1份
[儲存條件及有效期]
試劑盒應(yīng)置2-8℃中避光保存，有效期12個月。
[適用儀器]
- 微量移液器和潔凈的吸頭
- 37℃恒溫箱或水浴鍋
- 計時器
- 洗板機(jī)
- 振動器
- 酶標(biāo)儀 檢測波長450nm，參考波長630nm。
[樣本要求]
- 樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備，按照正常的采血技術(shù)收集血液，全血標(biāo)本先放置37℃處理2小時，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘以上，使血清（漿）不含或極少含血細(xì)胞。如果為抗凝血樣本，樣本離心后，再室溫放置2小時以上。
- 樣品可以使用血清或者血漿，檸檬酸，肝素或EDTA等抗凝劑不會影響實驗結(jié)果。
- 樣品中含用疊氮鈉會影響實驗的結(jié)果，高度溶血的樣品、沒有*收縮的血清樣品或者有微生物污染的樣品可能會引起錯誤結(jié)果。
- 新鮮的樣品在2-8℃無菌條件可保存一個星期，新鮮樣品可長期貯存-20℃或以下，避免反復(fù)凍融。
[檢驗方法]
- 從冷藏環(huán)境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同樣將濃縮洗滌液做1:20稀釋。
- 待測樣本用樣本稀釋液1:1000稀釋，每孔加入100μl，并設(shè)陰性對照、陽性對照各2孔，分別加入陰、陽性對照100μl，再設(shè)空白對照1孔，置37℃溫浴60分鐘，棄去孔內(nèi)樣本，拍干。
- 洗板：
- 手工洗板：棄去反應(yīng)板條孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干；用洗滌液注滿每孔，勿溢出，靜置5-10秒，棄去孔內(nèi)洗滌液拍干，如此反復(fù)5次，拍干。
- 洗板機(jī)洗板：選擇洗滌5次的程序洗板，洗液盈注滿每孔，并確保每次吸凈無殘留，zui后在吸水紙上拍干。
- 每孔加酶結(jié)合物100μl，空白對照孔不加，貼上膠紙，置37℃孵育30分鐘，同上洗板5次。
- 每孔加顯色劑A液、B液各50μl，輕輕振蕩后，置37℃避光孵育15分鐘。
- 每孔加入終止液50μl終止反應(yīng)，空白調(diào)零，在酶標(biāo)儀中讀取各孔OD值（450nm/630nm）。
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