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細胞破壁方法的很多種,常規(guī)的有高壓勻漿法、超聲破碎法、酶溶法等,這些破壁的方法各有優(yōu)缺點,下面簡單介紹一下:
一、高壓勻漿法
設備是高壓勻漿器,它由高壓泵和勻漿間組成,美國Microfluidics公司和ATS公司均有產品出售。其破碎機理:細胞在一系列過程中經歷了高速造成的剪刀,碰撞以及由高壓到常壓的變化從而造成細胞的破碎。
存在的問題;較易造成堵塞的團狀或絲狀真菌,較小的革蘭氏陽性首以及有些亞細胞器,質地堅硬,易損傷勻漿閥,也不適合用該法處理。
二、超聲破碎
頻高于15-20KHz的超聲波在高強度聲能輸入下可以進行細胞破碎。其破碎機理:可能與空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪切力有關。超聲破碎的效率與聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度及首種類型等因素有關。
存在問題;超聲波破碎在實驗室規(guī)模應用較普遍,處理少量樣品時操作簡便,液量損失少,但是超聲波產生的化學自由基團能使某些敏感性活性物質變性失活。而且大容量裝置聲能傳遞,散熱均有困難。
三、酶溶法
就是用生物酶將細胞壁和細胞臘消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。
存在的問題;易造成產物抑制作用,這可能是導致胞內物質釋放率低的一個重要因素。而且溶酶價格高,限制了大規(guī)模利用。若回收溶酶,則又增加百分離純化溶酶的操作。另外酶港法通用性差,不同菌種需選擇不同的酶。
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如果采用IKN細胞破壁均質機來破碎,植物細胞的破壁率將大大提高。采用IKN細胞破壁均質機可將海藻植物細胞破壁的破壁率提高到95%以上。而且生產效率非常高,操作簡單。
IKN細胞破壁均質機的結構:細胞破壁均質機是由膠體磨+均質機的組合而成的高科技產品。可以先將植物物料先研磨,研磨細化后再通過分散頭,進行分散,這樣可以避免細胞細化后抱團現(xiàn)象,從而提高細胞的破壁率。
*級由具有精細度遞升的三級鋸齒突起和凹槽。定子可以無限制的被調整到所需要的與轉子之間的距離。在增強的流體湍流下,凹槽在每級都可以改變方向。(齒列的深度:從開始的2.7mm,到末端的0.7mm)
第二級由轉定子組成。分散頭的設計也很好地滿足不同粘度的物質以及顆粒粒徑的需要。
細胞破壁均質機的特點
① 線速度很高,剪切間隙非常小,當物料經過的時候,形成的摩擦力就比較劇烈,結果就是通常所說的濕磨
② 定轉子被制成圓椎形,具有精細度遞升的三級鋸齒突起和凹槽。
③ 定子可以無限制的被調整到所需要的與轉子之間的距離
④ 在增強的流體湍流下,凹槽在每級都可以改變方向。
⑤ 高質量的表面拋光和結構材料,可以滿足不同行業(yè)的多種要求。
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