甲氧芐氨嘧啶檢測試劑盒
使用說明書
(酶聯(lián)免疫法)
1 原理及用途
甲氧芐氨嘧啶檢測試劑盒采用競爭ELISA方法檢測組織、飼料、尿樣和血清等樣品中的甲氧芐氨嘧啶(Trimethoprim,TMP),試劑盒由預(yù)包被甲氧芐氨嘧啶抗體的酶標(biāo)板、TMP酶標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的甲氧芐氨嘧啶和TMP酶標(biāo)記物競爭酶標(biāo)板上預(yù)包被的甲氧芐氨嘧啶抗體,用TMB底物顯色后,樣本吸光度值與樣本甲氧芐氨嘧啶含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中甲氧芐氨嘧啶的殘留量。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 靈敏度:0.015ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:37℃,45min~15min
2.3 檢測下限:
飼料 0.8ppb
組織(魚/蝦/肉) 0.2ppb
血清/尿液/血漿 0.2ppb
3 組成
酶標(biāo)板 96孔
標(biāo)準(zhǔn)液6瓶
高標(biāo)準(zhǔn)液:1瓶
酶標(biāo)記物 1瓶
底物液A 1瓶
底物液B 1瓶
終止液1瓶
濃縮復(fù)溶液1瓶
濃縮洗滌液1瓶
說明書 1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
4.3 試劑:無水甲醇、正己烷、鹽酸、氫氧化鈉
5 結(jié)果分析
5.1 百分吸光率的計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液(0ppb)的吸光度值,再乘以*,即
百分吸光度值(%)= | A | ×* |
A0 |
A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo),對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度(ppb)的對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實(shí)際濃度。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(索?。?/span>
6 注意事項(xiàng)
6.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
6.2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
6.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。
6.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
6.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm< 0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
6.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
7 貯藏及保存期
儲藏條件:于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。