IPTG誘導劑 IPTG廠家 IPTG價格
中文品名: 異丙基-β-D-硫代吡-喃半乳糖苷
商品名稱: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside
英文簡稱: IPTG
產(chǎn)品別名: Isopropyl β-D-Thiogalactoside
通用CAS : 367-93-1
EINECS號：206-703-0
分 子 式：C9H18O5S
分 子 量：238.3012
產(chǎn)品純度: Sigma ≥99%, Merck ≥98% ，INALCO≥99%
產(chǎn)品性狀: 白色或白色粉末,溶于水后呈清亮無色液體 分 子 式: C9H18O5S 分 子 量: 238.30
保存溫度: 2-8°C冷藏保存 ,配制好后保存于-20°C，室溫可放置一個月
主要作用：異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實驗室廣泛應用。
誘導原理
首先
E.coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙酰基轉(zhuǎn)移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調(diào)節(jié) 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與O序列結(jié)合，使操縱子（元）受阻遏而處于關(guān)閉狀態(tài)。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結(jié)合位點。由P序列、O序列和CAP結(jié)合位點共同構(gòu)成lac操縱子的調(diào)控區(qū)，三個酶的編碼基因即由同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié)，實現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達 。
其次
在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處于阻遏狀態(tài)。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合，阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié) 合，抑制轉(zhuǎn)錄起動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞，經(jīng)β-半乳糖苷酶催化，轉(zhuǎn)變?yōu)楫惾樘?。后者作為一種誘導劑分子結(jié)合阻遏蛋白，使蛋白構(gòu)象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉(zhuǎn)錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與異乳糖相同，是一 種作用*的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應用。
使用方法
首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
作用編輯
誘導外源基因的表達，普遍應用于原核表達系統(tǒng)，使其表達量增高，產(chǎn)物穩(wěn)定，具有易鑒定，易純化的優(yōu)點。
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