Hoechst 33342 *超級純*

Hoechst 33342 *超級純*

產(chǎn)品描述

Hoechst 33342是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低，在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst 系列染料因與DNA結合的特性，也常被用來進行線粒體DNA的觀察。Hoechst33258和Hoechst33342是兩種非常相近的Hoechst染料，他們都在紫外段350nm被激發(fā)，發(fā)射波長都為461nm，兩種染料經(jīng)常被用來替代另一種熒光染料DAPI. Hoechst 33342比33258具有更強的親脂性，因此能更好的透過完整的細胞膜，在部分實驗中Hoechst33258的細胞透過性存在明顯不足。用于細胞核染色時，*的Hoechst 33342工作終濃度為0.5-5μM，在一些敏感性實驗時，設置多個染色濃度，以獲得*染色效果。

技術參數(shù)

光學性質：Ex(nm)：350      Em(nm)：461

化學參數(shù)：分子量：561.93  溶劑：Water        CAS：23491-52-3

使用方法

1.緩沖液制備。用PBS或合適的緩沖液制備10～50µM Hoechst 33342染色液。

2.固定的細胞或組織染色。對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。依次按步驟進行免疫熒光染色，和Hoechst33342染色。如果不進行免疫熒光染色，則直接按步驟進行Hoechst33342染色。

a)對于貼壁細胞或組織切片：加入適量Hoechst 33342染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。

b)吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或氯化鈉溶液洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

c)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350nm，發(fā)射波長461nm。

3.活細胞或組織染色

a)細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33342染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1ml染色液，對于96孔板一個孔需加入100μl染色液。

b)在37℃培養(yǎng)細胞10～20分鐘。

c)用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

d)直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350nm，發(fā)射波長461nm。

運輸與保存方法

冰袋（wet ice）運輸。-20℃干燥避光保存，保質期12個月。

注意事項

1.  Hoechst 33342溶于水，溶解度可達20μM(約10mg/ml)。您也可直接購買20μM的液體規(guī)格產(chǎn)品（貨號:A5430L2670）。

2.  Hoechst 33342對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

3.  熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

4. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

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