HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 保存 | 價(jià)格 |
HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒 | E1010L2100 | 10 T | 4℃ | 550 |
HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒 | E1010L2101 | 100 T | 4℃ | 1550 |
產(chǎn)品介紹
HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒適用于從抗凝處理的全血樣品中快速、高效地提取基因組DNA。提取過程采用超順磁性微球,無需離心操作;使用預(yù)制的緩沖液,可直接進(jìn)行提取,無需預(yù)先去除紅細(xì)胞。
本產(chǎn)品既可以手動(dòng)進(jìn)行少量樣品的提取,也適合于用自動(dòng)化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切,PCR擴(kuò)增、檢測等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | HiPuri Beads全血基因組DNA提取磁珠試劑盒 |
HiPuri Beads™ ① | 保存于2~8℃,避免冷凍。 |
Lysis Buffer ② | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。 |
Binding Buffer ③ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請加入異丙醇。 |
Washing Buffer I ④ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請加入無水乙醇。 |
Washing BufferⅡ ⑤ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。*使用前請加入無水乙醇。 |
Elution Buffer ⑥ | 15~25℃密閉儲(chǔ)存。 |
Proteinase K Solution ⑦ | 15~25℃下可保存1年,2~8℃下可*保存。 |
異丙醇 | 分析純,需用戶自備。 |
無水乙醇 | 分析純,需用戶自備。 |
磁性分離器 | 需用戶自備,可從李記生物公司購買。 |
保質(zhì)期 | 2年 |
操作流程
*使用前:
1、在Binding Buffer(③)中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的異丙醇(分析純),并于“口”內(nèi)打上“√”,混勻后室溫下密閉保存。
2、在Washing Buffer I (④)中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的無水乙醇(分析純),并于“口”內(nèi)打上“√”,混勻后室溫下密閉保存。
3、在Washing BufferⅡ(⑤)中加入量(見瓶身標(biāo)簽)的無水乙醇(分析純),并于“口”內(nèi)打上“√”,混勻后室溫下密閉保存。
準(zhǔn)備工作
1、1.5mL離心管:2個(gè)/樣品
2、單通道移液器:20μL、200μL、1000μL
3、漩渦振蕩器
4、垂直混合儀
5、恒溫水浴鍋/金屬?。?5℃
操作步驟:
1、裂解
取一個(gè)新的1.5mL離心管,加入200μL的抗凝血液樣品(不足200μL時(shí)可用PBS或Elution Buffer(⑥)補(bǔ)足),再分別加入10μL的Proteinase K Solution (⑦)和230μL的Lysis Buffer (②),以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10s后,置于55℃條件下反應(yīng)5min。
2、結(jié)合
加入320μL的在Binding Buffer(③)(檢查是否已加入異丙醇)和20μL的HiPuri Beads(①),以渦旋振蕩器zui大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10min(或漩渦震蕩10s后置于垂直混合儀上反應(yīng)10min)。然后將離心管置于磁性分離器上放置2min,用移液器去上清液并取下離心管。
注:此步驟的磁性分離時(shí)間應(yīng)不少于2min。
3、洗滌
(1)加入600μL Washing Buffer I (④)(檢查是否已加入無水乙醇),漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次,使磁珠20次,使磁珠充分重懸,再將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,用移液器去上滑液并取下離心管。重復(fù)該步驟一次。
(2)加入600μL Washing BufferⅡ(⑤)(檢查是否已加入無水乙醇),漩渦震蕩1min或用移液器緩慢吹打磁珠20次,使磁珠充分重懸,再于室溫下靜置1min后,將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,用移液器移去上清液。
注:步驟(2)應(yīng)盡量除盡洗滌液。
4、干燥
保持離心管于磁性分離器上,于室溫下靜置10min后,取下離心管。
5、洗脫
加入100~200μL Elution Buffer (⑥),用移液器緩慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重懸。然后于55℃條件下加熱5min,將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中,此即為純化得到的基因組DNA,可保存于-20℃。
注意事項(xiàng)
1、操作之前,請務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品手冊。
2、血液樣品的質(zhì)量對(duì)產(chǎn)物DNA的純化量有較大影響,應(yīng)避免反復(fù)凍融血液樣品。
3、應(yīng)避免對(duì)磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。
4、磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。
5、磁珠干燥前,應(yīng)使用移液器吸盡洗滌液。
6、應(yīng)避免磁珠過度干燥,否則會(huì)嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。
7、建議使用質(zhì)量好的離心管和移液器吸頭,避免因粘附磁珠而造成損失。
8、在96孔板中進(jìn)行磁性分離操作時(shí),磁珠吸附時(shí)間可適當(dāng)延長至4-5min。