犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
ELISA 實(shí)驗(yàn)步驟:
1.包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,多肽濃度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC過(guò)夜,洗凈。
2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,37oC1h,洗凈。
3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,37oC 30分鐘,洗凈。
4.稀釋辣根過(guò)氧化物每標(biāo)記的二抗0.1ml/孔,37oC 40分鐘,洗凈。
5.顯色:TMB顯色
A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍.
B液:5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml 。
終止液:2N硫酸
A液、B液各一滴,比光顯色10分鐘,終止液一滴。
6.450nm 波長(zhǎng)測(cè)OD值
犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)30分鐘。
洗 滌:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
顯 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。
終 止:每孔加入終止液50μl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
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總部位于上海,并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷(xiāo)或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶(hù)為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有專(zhuān)業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*的倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷(xiāo)商推崇的。
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