利用斑馬魚模型評價(jià)強(qiáng)健骨骼功效【評價(jià)原理】
斑馬魚的骨骼看似與人類差別明顯,實(shí)際上它的生長發(fā)育過程和調(diào)控機(jī)制與哺乳動(dòng)物高度相似。而且斑馬魚骨骼發(fā)育迅速,適合快速建立骨骼疾病模型。在大量攝入糖皮質(zhì)激素(以潑尼松為例)后,斑馬魚會出現(xiàn)繼發(fā)性骨質(zhì)疏松。
骨密度幾乎由骨骼中鈣含量來反映,應(yīng)用特異性地結(jié)合鈣的熒光染料染色(呈綠色),用其熒光強(qiáng)度可反映骨密度。斑馬魚骨骼染色后經(jīng)熒光顯微鏡采集到的熒光強(qiáng)度能夠客觀反映骨密度。
利用斑馬魚模型評價(jià)強(qiáng)健骨骼功效【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將測試斑馬魚分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品組。其中正常對照組未加入潑尼松,模型對照組與服用強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品組加入了等量的潑尼松(潑尼松通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品組在加入潑尼松的同時(shí)加入碳酸鈣、維生素之類的強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品。
服用一段時(shí)間強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品后,我們對斑馬魚整體做鈣黃綠素染色,觀察脊椎骨熒光強(qiáng)度。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚脊椎骨表型圖
黃色虛線區(qū)域為脊椎骨
可以看到,服用強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品的脊椎骨骨密度與正常對照組比較相似,沒有明顯的骨質(zhì)疏松。
【評價(jià)結(jié)論】
1. 經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實(shí)驗(yàn),服用強(qiáng)健骨骼產(chǎn)品組的骨密度與未經(jīng)潑尼松處理的正常對照組相似,并未出現(xiàn)模型對照組的骨質(zhì)疏松的情況。
2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了碳酸鈣、維生素具有顯著的強(qiáng)健骨骼功效。