利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)長(zhǎng)期毒性
【評(píng)價(jià)原理】
斑馬魚與人類的基因相似率高達(dá)87%, 與哺乳類動(dòng)物相比, 斑馬魚的信號(hào)傳導(dǎo)以及生li結(jié)構(gòu)和功能方面都非常相似。斑馬魚能夠?qū)Ρ=∑吩隗w內(nèi)的分布情況、吸收情況、代謝以及排泄等生li動(dòng)態(tài)方面提供準(zhǔn)確的信息, 尤其對(duì)小分子所引起的內(nèi)分泌紊亂、再生毒性、行為缺陷、致畸、心血管毒性、肝毒性等毒性反應(yīng)與人具有高度相似性。因此,使用斑馬魚作為保健品早期的安全性評(píng)價(jià)是非常可靠的。
用石蠟包埋法制作斑馬魚病理切片,在顯微鏡下可觀察各靶器官毒性狀況。
【實(shí)驗(yàn)方案】利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)長(zhǎng)期毒性
我們將受測(cè)試斑馬魚分成兩組,分別是正常對(duì)照組和服用供試品組(供試品通過(guò)溶解到養(yǎng)魚用水中攝入到斑馬魚體內(nèi))。通過(guò)環(huán)特生物劑量換算公式,將人每日推薦服用劑量換算為斑馬魚使用濃度進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。
服用一段時(shí)間供試品后,將斑馬魚固定、脫水、包埋、切片,進(jìn)行H&E染色,我們觀察斑馬魚各組織臟器結(jié)構(gòu)病理變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚肝臟病理切片
可以看到,正常對(duì)照組肝組織結(jié)構(gòu)規(guī)則,肝細(xì)胞形態(tài)完整,細(xì)胞質(zhì)均勻,細(xì)胞核呈規(guī)則圓形,位于細(xì)胞中央;供試品組肝臟紅細(xì)胞淤積嚴(yán)重,細(xì)胞腫脹現(xiàn)象嚴(yán)重,局部可見(jiàn)炎性浸潤(rùn),壞死。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1. 經(jīng)過(guò)每組10尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用供試品組的斑馬魚誘發(fā)明顯的肝臟毒性,。
2. 本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了該供試品對(duì)斑馬魚有長(zhǎng)期毒性風(fēng)險(xiǎn)。