名稱:Human ADM(Adrenomedullin) ELISA試劑盒
中文名稱:人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
英文名稱:Human ADM(Adrenomedullin) ELISA Kit
貨號:EH0779
別稱:ADM(Adrenomedullin)|AM ELISA Kit
適應(yīng)種屬:人源
規(guī)格:48T/96T
存儲:在2-8℃存儲6個(gè)月
UNIPROT ID:P35318
應(yīng)用:ADM(Adrenomedullin) ELISA試劑盒可以在體外定量測定血漿、組織勻漿和其他生物液體中的ADM濃度.
檢測方法: 雙抗夾心法
檢測范圍: 6.25-400pg/ml
靈敏度: < 3.75pg/ml
標(biāo)準(zhǔn)曲線:由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
回收率:將一定含量的ADM摻入下表列出的樣本中,并通過將測量值與樣品中ADM的預(yù)期量進(jìn)行比較來計(jì)算回收率.
| 回收范圍(%) | 平均值(%) |
血清(n=5) | 88-101 | 94 |
EDTA血漿(n=5) | 96-98 | 97 |
肝素血漿(n=5) | 87-104 | 96 |
線性度:通過檢測摻有適當(dāng)濃度ADM的樣品及其系列稀釋液來測定試劑盒的線性,用檢測濃度相對于預(yù)期的百分比來表示線性。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
血清(n=5) | 85-97% | 90-102% | 90-105% | 86-101% |
EDTA血漿(n=5) | 91-* | 82-99% | 82-96% | 83-99% |
肝素血漿(n=5) | 87-98% | 80-94% | 83-94% | 80-96% |
變異系數(shù)(%):批內(nèi)差:CV<8% 批間差:CV<10%
注意事項(xiàng):僅供科研使用
Human ADM(Adrenomedullin) ELISA試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人ADM抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人ADM會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ADM抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??谷薃DM抗體與結(jié)合在包被抗體上的人ADM結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,ADM濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中ADM的濃度。
試驗(yàn)所需自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
操作步驟:
1. 對應(yīng)板孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘
2. 棄掉板內(nèi)液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘
3. 棄掉板內(nèi)液體,洗板3次
4. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內(nèi)液體,洗板5次
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右
6. 每孔加入50μL終止液
7. 立即在450nm波長下讀數(shù),處理數(shù)據(jù)