| 一、細(xì)胞基本屬性 | |
| 細(xì)胞名稱 | 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 |
| 細(xì)胞別稱 | RPMI 8226; RPM.8226; RPMI8226; RPMl no 8226; 8226; RPMIl 8226/S; RPMI-8226S; RPMI8226/S; 8226/S; RoswellPark Memorial lnstitute 8226; GM02132; GM2132; GM 2132; Simpson |
| 細(xì)胞貨號 | SNL-181 |
| 細(xì)胞種屬 | 人 |
| 生長情況 | 半貼壁 |
| 培養(yǎng)條件 | 1640+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.輕輕吸走培養(yǎng)上清，留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞； 2.混勻細(xì)胞，收集細(xì)胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min，棄上清； 3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里； 4.補(bǔ)足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)； |
| 注意事項(xiàng) | 半貼壁細(xì)胞會附著瓶底，但貼壁不緊，輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，更適合吹打細(xì)胞操作，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
| 三、細(xì)胞凍存操作 | |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手*)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手*); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1.離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞； 2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管； 3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
| 注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips：
1.細(xì)胞半貼壁圓形生長，部分懸浮圓形，傳代時均可收集培養(yǎng)，換液時將懸浮細(xì)胞離心收集后重新接回原瓶，若貼壁細(xì)胞較多活性較好時可以不要懸浮的細(xì)胞；
2.傳代有部分細(xì)胞碎片可以換液后用PBS潤洗細(xì)胞清除，使用的PBS需要恢復(fù)到室溫，加入時不要沖到細(xì)胞面，潤洗盡量輕柔；
3.該細(xì)胞生長偏慢，比較容易死亡，不建議沒有相關(guān)細(xì)胞操作經(jīng)驗(yàn)的客戶單獨(dú)培養(yǎng)該細(xì)胞；
我們*使用尚恩生物RPMI 8226（人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞）鉆用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-181）作為體外培養(yǎng)RPMI 8226（人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
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