CellSurgeon細(xì)胞顯微手術(shù)系統(tǒng)
——德國(guó)ROWIAK的雙光子切割技術(shù)!
CellSurgeon 是一套基于紅外飛秒激光技術(shù)的多維納米切割系統(tǒng),設(shè)計(jì)用來(lái)以非接觸的方式,輕柔地操作細(xì)胞和細(xì)胞結(jié)構(gòu)。它可以用于改變細(xì)胞動(dòng)態(tài),使某些細(xì)胞器失活或者進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)。CellSurgeon是一款設(shè)備,同時(shí)具有很強(qiáng)的可定制性,使得以往難以實(shí)現(xiàn)和無(wú)法想象的研究成為可能。
主要特點(diǎn)一覽
。非接觸多維納米精度切割
。在單個(gè)活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行輕柔操作
。多光子共聚焦成像
。*的精度和高產(chǎn)性
。兼容各種顯微鏡和成像過(guò)程
??捎捎脩舳ㄖ聘鞣N特殊配置
。軟件功能強(qiáng)大,可以進(jìn)行數(shù)據(jù)分析、
。圖像處理和自動(dòng)程序操作
應(yīng)用領(lǐng)域
。3D切割
。對(duì)單個(gè)活細(xì)胞的操作和切割
。操控細(xì)胞骨架
。對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)
。亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的失活和消融
。細(xì)胞動(dòng)態(tài)研究
。光漂白
。多光子成像
。2D與3D成像
。時(shí)間序列實(shí)驗(yàn)
。活細(xì)胞成像
。標(biāo)記與篩選
典型應(yīng)用
1.納米手術(shù)
采用光學(xué)技術(shù)從精確敲除單個(gè)特定細(xì)胞器到切割單條細(xì)胞骨架,CellSurgeon允許進(jìn)行精確的納米級(jí)手術(shù)操作,在切割和消融亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)時(shí)不會(huì)影響到周圍的結(jié)構(gòu)。
2.細(xì)胞操作
CellSurgeon不只是一個(gè)納米精確切割設(shè)備。所用激光的能量也可以被用來(lái)執(zhí)行對(duì)標(biāo)記細(xì)胞結(jié)構(gòu)的漂白,以及對(duì)細(xì)胞內(nèi)機(jī)構(gòu)的光學(xué)刺激。
3.細(xì)胞凋亡
細(xì)胞凋亡是由多細(xì)胞生命體系中的單個(gè)細(xì)胞的程序性死亡構(gòu)成。這種單個(gè)細(xì)胞的死亡發(fā)生時(shí)不會(huì)對(duì)周圍區(qū)域的結(jié)構(gòu)發(fā)生傷害。細(xì)胞凋亡可以通過(guò)激光消融特定的細(xì)胞組分來(lái)誘導(dǎo),并伴隨了特征性的形態(tài)學(xué)變化和步驟,這些變化和步驟需要的成像方式來(lái)觀察和確認(rèn)。細(xì)胞凋亡在細(xì)胞終止,自我平衡(通過(guò)細(xì)胞分裂和細(xì)胞死亡來(lái)保持細(xì)胞數(shù)量恒定)和發(fā)育過(guò)程中扮演了重要的角色。我們的手指和腳趾來(lái)自于沒(méi)有任何凹陷的葉狀組織的細(xì)胞凋亡。這些相對(duì)緩慢的過(guò)程可以由CellSurgeon來(lái)獲得和誘導(dǎo)。
4.細(xì)胞遷移
細(xì)胞遷移是一個(gè)包含傷口愈合,免疫反應(yīng)和發(fā)育過(guò)程的中心事件。所有這些過(guò)程都要求細(xì)胞向特異性位置的協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)。遷移細(xì)胞具有清晰的極性。細(xì)胞骨架聚合(肌動(dòng)蛋白)與膜流動(dòng)一起參與到其中。細(xì)胞遷移是一個(gè)“慢速”的過(guò)程。因?yàn)樵谀じ浇蛘吣ど习l(fā)生很多的結(jié)構(gòu)變化。CellSurgeon可以用于影響(破壞)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)來(lái)研究膜流動(dòng)中的過(guò)程。
5.軸突生長(zhǎng)
由生長(zhǎng)錐執(zhí)行的神經(jīng)生長(zhǎng)具有三個(gè)關(guān)鍵的周期性階段。探測(cè),包括由肌動(dòng)蛋白逆向流和聚合活動(dòng)共同控制的伸展和回縮。由細(xì)胞外基質(zhì),細(xì)胞黏連蛋白和肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架共同的復(fù)雜作用控制的新的伸展部分向基質(zhì)的粘附。并且生長(zhǎng)錐的向前增長(zhǎng)期間產(chǎn)生的驅(qū)動(dòng)力,導(dǎo)致神經(jīng)突張力的產(chǎn)生。人們開(kāi)展了對(duì)生長(zhǎng)錐的多重結(jié)構(gòu)研究,包括多維成像,重疊和結(jié)構(gòu)的共定位。在進(jìn)行隨時(shí)間的激光切割后進(jìn)行時(shí)間序列研究,使得細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外的事件可視化。
6.光學(xué)穿孔
一個(gè)可能的應(yīng)用是對(duì)細(xì)胞原生質(zhì)體膜的激光穿孔以使得可以在活細(xì)胞中進(jìn)行DNA,RNA和蛋白的轉(zhuǎn)導(dǎo)。通過(guò)將激光聚焦在原生質(zhì)體膜上幾微秒的時(shí)間,可以在膜上產(chǎn)生瞬間的小孔,從而核酸與蛋白可以進(jìn)入細(xì)胞。與傳統(tǒng)的病毒質(zhì)粒,化學(xué)載體或者電穿孔技術(shù)相比,光學(xué)穿孔在很大程度上降低了細(xì)胞受損的風(fēng)險(xiǎn)。