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慢病毒包裝試劑盒

參考價(jià)1500.00-5400.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱南京江苑生物科技有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號(hào)JY03021
  • 所  在  地南京市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間2022/6/5 21:24:11
  • 訪問次數(shù)766
產(chǎn)品標(biāo)簽:

慢病毒包裝試劑盒輔助質(zhì)粒

規(guī)格
JY03021-10T1500.00元1000 盒可售
JY03022-20T2800.00元1000 盒可售
JY03023-40T5400.00元1000 盒可售
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南京江苑生物科技有限公司位于美麗富饒的中國江蘇省南京市,主要從事生物科研試劑研發(fā),生物技術(shù)服務(wù)等.產(chǎn)品已通過ISO--9001:2000國際標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)體系認(rèn)證,以滿足各種客戶的多層次需求,全體職員本著“以人為本,以質(zhì)取勝,持續(xù)改進(jìn),永續(xù)經(jīng)營”的企業(yè)生產(chǎn)理念,產(chǎn)品直銷全國各大高校實(shí)驗(yàn)室。我們承諾:為客戶提供價(jià)格合理,質(zhì)量?jī)?yōu)良的產(chǎn)品及服務(wù),以期提高市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)力,成為你值得信賴的供應(yīng)商。



生物試劑,抗體等
產(chǎn)地 國產(chǎn) 規(guī)格 10T
級(jí)別 化工級(jí) 保存條件 -20oC保存
江苑生物的慢病毒包裝試劑盒(Lentiviral Packaging Kit)由優(yōu)化的慢病毒包裝輔助質(zhì)?;旌衔铮≒ackaging Mix)、表達(dá)eGFP蛋白的對(duì)照質(zhì)粒(eGFP Control)和高效的轉(zhuǎn)染試劑(Transfection Reagent)組成,可以兼容第二代和第三代的慢病毒包裝質(zhì)粒。
慢病毒包裝試劑盒 產(chǎn)品信息

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

江苑生物的慢病毒包裝試劑盒Lentiviral Packaging Kit)由優(yōu)化的慢病毒包裝輔助質(zhì)粒混合物(Packaging Mix)、表達(dá)eGFP蛋白的對(duì)照質(zhì)粒(eGFP Control)和高效的轉(zhuǎn)染試劑(Transfection Reagent)組成,可以兼容第二代和第三代的慢病毒包裝質(zhì)粒。

Lentiviral Mix能夠表達(dá)病毒包裝需要的各種必需成分如:gag基因,編碼病毒主要的結(jié)構(gòu)蛋白;pol基因,編碼病毒特異性的酶;rev基因,編碼調(diào)節(jié)gagpol基因表達(dá)的調(diào)節(jié)因子;還含有單純皰疹病毒來源的VSV-G基因,提供病毒包裝所需要的包膜蛋白。江苑生物的慢病毒包裝系統(tǒng)產(chǎn)生的慢病毒感染目的細(xì)胞后不會(huì)再感染其他細(xì)胞,也不會(huì)利用宿主細(xì)胞產(chǎn)生新的病毒顆粒。慢病毒中的毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代,屬于假型病毒。

本試劑盒具有慢病毒包裝時(shí)間周期短(一周之內(nèi)即可獲得純化好的高滴度慢病毒)和病毒滴度高的優(yōu)勢(shì),可應(yīng)用于針對(duì)不同基因和藥物靶標(biāo)的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。非常適合于病毒包裝初試者。

產(chǎn)品組分

組分名稱

儲(chǔ)存

產(chǎn)品貨號(hào)/規(guī)格

JY03021

JY03022

JY03023

Packaging Mix

-20℃

150 μL

300 μL

600 μL

eGFP Control

-20℃

7.5 μg

7.5 μg

7.5 μg

Transfection Reagent

4℃

240 μL

480 μL

960 μL

保存條件

冰袋運(yùn)輸。Transfection Reagent 4 oC保存,長(zhǎng)期不使用可-20oC保存。其余組分均于-20℃保存, 避免反復(fù)凍融。保質(zhì)期1年有效。

注意事項(xiàng)

1.廢棄的含病毒的培養(yǎng)基中加入84消毒液(1:20左右),浸泡1天后丟棄。接觸過病毒的槍頭,離心管,培養(yǎng)板等其他物品可用84消毒液稀釋液處理,也可以用煮沸處理半小時(shí)或常規(guī)滅菌(121℃20 min)。

2.本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究。

3.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

還需準(zhǔn)備的其他實(shí)驗(yàn)材料

1.表達(dá)目的基因的慢病毒載體質(zhì)粒:在慢病毒包裝前,需要先獲得感興趣的目的基因慢病毒載體,該載體可能表達(dá)目的基因、shRNAmicroRNA等。以無內(nèi)毒素高純度的試劑盒提取表達(dá)目的基因的慢病毒載體質(zhì)粒,并將質(zhì)粒DNA溶于無菌的TEddH2O中,測(cè)定其濃度及純度,保證質(zhì)粒DNAA260/A2801.8-2.0之間。江苑生物提供基因過表達(dá)、shRNA/miRNA介導(dǎo)的基因沉默、CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因敲除等服務(wù)。

2.慢病毒包裝用293T細(xì)胞株:良好的細(xì)胞狀態(tài)對(duì)病毒的包裝至關(guān)重要,避免細(xì)胞培養(yǎng)基有細(xì)菌、真菌或支原體的污染,盡量使用傳代次數(shù)較少的細(xì)胞,如果細(xì)胞是剛復(fù)蘇的話,更好傳兩代之后再包裝。

3.細(xì)胞培養(yǎng)基,血清和雙抗等

4.其他常用實(shí)驗(yàn)耗材(如10 cm培養(yǎng)皿,離心管等)

使用說明

10 cm培養(yǎng)皿為例:

1.293T細(xì)胞分盤:轉(zhuǎn)染前,將293T細(xì)胞以合適的比例傳代到10 cm培養(yǎng)皿中,當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到70%-90%時(shí)準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染。

注:細(xì)胞要充分消化,成團(tuán)細(xì)胞影響轉(zhuǎn)染效率。

2.轉(zhuǎn)染前換液:轉(zhuǎn)染前將需要轉(zhuǎn)染的細(xì)胞換成新鮮的*培養(yǎng)基(含有血清和抗生素),10 mL/10 cm皿。注:293T細(xì)胞貼壁性不是很好,換液時(shí)應(yīng)小心滴加盡量避免沖起細(xì)胞??股睾脱宀粫?huì)影響轉(zhuǎn)染效率,也不會(huì)在細(xì)胞轉(zhuǎn)染后導(dǎo)致細(xì)胞毒性。

3.轉(zhuǎn)染:取無菌的離心管,加入750 μL DMEM(不含血清和抗生素),7.5 μg表達(dá)目的基因的慢病毒載體質(zhì)粒(自行提供),和15 μL Packaging Mix,用槍輕輕吹打混勻;再加入25 μL Transfection Reagent,用槍輕輕吹打混勻,請(qǐng)?zhí)貏e注意不可Vortex或離心。將混合液均勻滴加到提前換液的培養(yǎng)皿中,輕輕混勻,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),后續(xù)無需在數(shù)小時(shí)后更換培養(yǎng)液。

DMEM

750 μL

表達(dá)目的基因慢病毒載體質(zhì)粒

(或者eGFP Control,作為對(duì)照)

7.5 μg

(eGFP Control 7.5 μg)

Packaging Mix

15 μL

Transfection Reagent

25 μL

注:上述混合液室溫存放6 h內(nèi)穩(wěn)定。

4.病毒收集:轉(zhuǎn)染36 h左右后,吸取上清至新的離心管中,4保存。另外添加10 mL新鮮的*培養(yǎng)基到細(xì)胞中,注意不要沖起細(xì)胞。再次大約36 h后,收取上清至同一個(gè)離心管中。將兩次收集的上清用0.45 μm濾器過濾后轉(zhuǎn)移到新的離心管中(若沒有0.45 μm濾器,將上清3000 rpm,4 ℃離心5 min,棄沉淀亦可)。此時(shí)上清液中的病毒顆粒可以直接檢測(cè)滴度或者感染目的細(xì)胞,如果對(duì)病毒的滴度及純度有較高要求,可對(duì)上清液進(jìn)行濃縮與純化。

注:如果使用濾器過濾,只能使用低蛋白結(jié)合力的纖維素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜,不能用硝酸纖維素膜(NC)。

5.(可選)慢病毒濃縮:可以使用江苑生物的慢病毒濃縮試劑盒(JY03011進(jìn)行慢病毒濃縮,效率更高。同時(shí),也可以自行配制PEG-8000慢病毒濃縮液濃縮慢病毒。

6.病毒分裝與保存:將病毒上清或濃縮后的病毒分裝,保存于-80℃

注:病毒液一定要分裝,切忌反復(fù)凍融,凍融一次病毒滴度將降低20-60%

293T 慢病毒包裝.jpg

1 江苑生物與**公司慢病毒包裝試劑盒包裝效率比較


關(guān)鍵詞:離心管 培養(yǎng)皿
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