2',7'-二氯熒光素二乙酸酯 天津本生
中文名稱:2',7'-二氯熒光素二乙酸酯
英文名稱:2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate
別名: DCFH-DA
CAS No:4091-99-0 分子式:C24H16Cl2O7 分子量:487.29
MDL:MFCD00128955
規(guī)格:25mg/50mg/100mg/1g
外觀與性狀:白色粉末
溶解性:溶于DMSO (25 mg/ml)
保存條件:-20℃ 避光 干燥
包裝:25mg 50mg 100mg 500mg 1g in glass bottle
產(chǎn)品描述:
2',7'-二氯熒光素二乙酸酯 天津本生 產(chǎn)品簡介:
一種細(xì)胞可滲透的非熒光探針。在細(xì)胞內(nèi)脫酯化的并可經(jīng)氧化轉(zhuǎn)化為具有強(qiáng)熒光的2′,7′-二氯熒光素。
應(yīng)用包括響應(yīng)氧化代謝的活性氧的靈敏快速定量;用于吞噬細(xì)胞中的氧化產(chǎn)物的微孔板檢測;以及定量多孔髓樣分化測定。
細(xì)胞染色方案(僅供參考):
1.制備1-10mM DMSO儲備溶液。 應(yīng)將未使用的DMSO儲備溶液等分到單次使用的小瓶中并儲存在-20℃,避光。
2.在生理緩沖液(如PBS,HBSS,HEPES)中使染料的工作濃度為1-10μM。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定最佳工作濃度。
3.從生長培養(yǎng)基中取出細(xì)胞,將染料工作溶液(來自步驟2)加入細(xì)胞中,并在室溫或37℃下孵育細(xì)胞5至60分鐘。
4.去除染料工作溶液; 用預(yù)熱的HBSS洗滌,加入預(yù)熱的HBSS或生長培養(yǎng)基,在最佳溫度下孵育。 最佳孵育時(shí)間可能相差較大,因?yàn)橐恍┘?xì)胞類型通常表現(xiàn)出低水平的酯酶活性。
5.在將細(xì)胞暴露于實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)物之前,確定加載細(xì)胞樣品的基線熒光強(qiáng)度。
6.陰性對照應(yīng)評估如下:
A:檢查未染色的細(xì)胞在綠色發(fā)射范圍內(nèi)的自發(fā)熒光。
B:對于流式細(xì)胞術(shù),確定染料加載和處理后細(xì)胞的正向和側(cè)向散射不變。細(xì)胞尺寸的變化可能與處理或毒性反應(yīng)引起的起泡或收縮有關(guān)。
C:檢測有沒有誘導(dǎo)物的染料和緩沖液/培養(yǎng)基的無細(xì)胞混合物的熒光。在沒有細(xì)胞外酯酶和其他氧化酶的情況下,熒光隨時(shí)間的逐漸增加可能與自發(fā)水解,大氣氧化或光誘導(dǎo)有關(guān)。
D:檢查已經(jīng)保存在生長培養(yǎng)基或簡單緩沖液中的未處理(對照)負(fù)載細(xì)胞的熒光。在染料加載孵育后,健康細(xì)胞應(yīng)表現(xiàn)出低水平的熒光,在實(shí)驗(yàn)期間相對穩(wěn)定; 然而,可以觀察到熒光逐漸增加(由于自動氧化)或減少(由于細(xì)胞中的染料損失或光漂白)。 在沒有任何刺激或誘導(dǎo)的情況下,健康的未經(jīng)處理的細(xì)胞中的熒光突發(fā)可以指示細(xì)胞死亡或一些其他氧化事件的進(jìn)展。
7.可以用H2O2或叔丁基過氧化氫(TBHP)刺激陽性對照至終濃度~100μM(基于細(xì)胞的敏感性和反應(yīng)增加或減少劑量)。
2',7'-二氯熒光素二乙酸酯 本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。