•利用熒光計(jì)檢測低至 ~0.3 pg 的 RNase A
• 簡單且直接的30分鐘測定
RNaseAlert™ 實(shí)驗(yàn)室檢測試劑盒 v2 采用一種全新且靈敏度更高的新型 RNA 底物,該底物一端標(biāo)記有熒光報(bào)告基團(tuán)分子 (fluor) 和另一端標(biāo)記有淬滅基團(tuán)。在不存在 RNase 的情況下,淬滅劑的物理接近會(huì)將 fluor 中的熒光抑制到極低水平。然而,當(dāng) RNA 酶存在時(shí),RNA 底物被裂解,fluor 和淬滅劑在溶液中的空間上是分離的。這導(dǎo)致 fluor 在被適當(dāng)波長的光激發(fā)時(shí)發(fā)出明亮的綠色信號。
熒光可以很容易地通過基于過濾器或單色器的熒光計(jì)檢測到。由于 RNaseAlert™ 底物的熒光在 RNase 活性存在時(shí)會(huì)逐漸增加,因此可對使用熒光計(jì)監(jiān)測得到的結(jié)果進(jìn)行動(dòng)力學(xué)評估。RNaseAlert™ 底物的序列經(jīng)過精心優(yōu)化,可檢測幾種 RNase,包括 RNase A、RNase T1、RNase I、微球菌核酸酶、S1 核酸酶、綠豆核酸酶和 Benzonase™。
迅速且便利的實(shí)驗(yàn)方案
RNaseAlert™ 程序僅需幾分鐘即可完成設(shè)置。凍干的熒光底物復(fù)溶于提供的管中,并與檢測溶液一起孵育幾分鐘。然后用熒光計(jì)讀取結(jié)果。與陰性對照品相比明顯發(fā)熒光的樣品已受到污染,不應(yīng)與 RNA 一起使用。提供無核酸酶水和 RNase A 作為對照。