用于 SEAP（分泌型胎盤堿性磷酸酶）報告基因檢測的 NovaBright™ Phospha-Light™ EXP 檢測試劑盒

NovaBright™ Phospha-Light™ EXP 檢測試劑盒是第二代化學(xué)發(fā)光報告基因檢測方法，用于分泌型胎盤堿性磷酸酶 (SEAP) 或非分泌型胎盤同工酶 (PLAP) 的超靈敏檢測。該方法的超靈敏檢測動態(tài)范圍達(dá)5個數(shù)量級該測定系統(tǒng)使用高性能堿性磷酸酶底物 CSPD™、專有的新一代化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)劑以及專有的可特異性抑制內(nèi)源性非胎盤型堿性磷酸酶活性的緩沖液系統(tǒng)，其性能超過了前幾代化學(xué)發(fā)光檢測方法，同時也大大優(yōu)于比色法和熒光檢測方法。該新試劑盒比其他檢測方法操作過程簡單得多。該方法為勻質(zhì)檢測，僅需兩種溶液，且這兩種溶液均為即用型。延長的發(fā)光動力學(xué)提供了穩(wěn)定的光信號，增加了信號讀取時間的靈活性檢測信號直接用化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀測量，不需要使用加樣器報告蛋白SEAP分泌到細(xì)胞培養(yǎng)基中，可通過對培養(yǎng)基取樣檢測出。由于 SEAP 是分泌到培養(yǎng)基中的，因此無需細(xì)胞裂解。同時，亦可通過裂解細(xì)胞檢測堿性磷酸酶胎盤型同功酶（PLAP）靈敏的堿性磷酸酶報告基因酶檢測方法在許多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用，包括基因表達(dá)、病毒功能檢測、疫苗開發(fā)、基因治療用病毒載體及基因遞送方法的開發(fā)、體內(nèi)基因表達(dá)監(jiān)測和新的細(xì)胞功能分析。SEAP檢測是、也是速的轉(zhuǎn)染效率優(yōu)化方法之一。前幾代 NovaBright™ 分泌型胎盤堿性磷酸酶 (SEAP) 報告基因化學(xué)發(fā)光報告基因檢測試劑盒 2.0 廣泛用于報告基因檢測，以測量已建立的細(xì)胞系和轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞中的基因表達(dá)，包括基因敲低/RNA 干擾讀取。該測試方法廣泛用于病毒功能檢測，包括病毒基因表達(dá)檢測、病毒復(fù)制、病毒融合性、病毒的中和和病毒介導(dǎo)的細(xì)胞間融合、以及病毒感染性。使用 SEAP 報告蛋白，通過檢測轉(zhuǎn)基因、轉(zhuǎn)染或病毒載體感染的動物血清樣本，即可輕松完成體內(nèi)報告基因檢測。NovaBright™ 報告基因檢測系統(tǒng)已用于測量轉(zhuǎn)基因或轉(zhuǎn)染的整體動物血清（包括小鼠、大鼠、狨猴、猴子和豬血清以及雞卵尿囊液）中的 SEAP 水平。最近，開發(fā)了小鼠 SEAP 蛋白 (mSEAP) 以提高轉(zhuǎn)基因小鼠中 SEAP 蛋白的穩(wěn)定性，并且 NovaBright™ SEAP 測定試劑盒已用于 mSEAP 的靈敏檢測。除了用在報告基因（基因表達(dá)）領(lǐng)域外，該檢測系統(tǒng)還可利用SEAP蛋白作為功能性報告基因，用于配體上嵌合了SEAP蛋白的、受體－配體結(jié)合反應(yīng)，蛋白酶介導(dǎo)的蛋白分泌及分泌途徑活性的測量。NovaBright™ 測定系統(tǒng)也可用于以非胎盤型堿性磷酸酶為生物標(biāo)記物的細(xì)胞學(xué)檢測。