產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒

樣品 DNA 的制備：
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

特點(diǎn)：
高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100；
操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

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反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

人線(xiàn)粒體[NADP]異檸檬酸脫氫酶(IDH)ELISA試劑盒67879-58-710mg Caftaric acid 0.312-20 ng/mL單咖酰石酸

LesEndo瓊脂5kg 250gformazan溶解液（DMSO)

M-FC肉湯/濾膜糞大腸菌肉湯/M-FCBroth4472908/4304437/4367659大腸桿菌群的濾膜法檢測(cè)北京ABI PCR Mix 4472908/4304437/4367659

硝酸鹽鉀培養(yǎng)基基礎(chǔ)/KCN培養(yǎng)基基礎(chǔ)/PotassiumCyanideMediumBase子起生物用于鑒別腸道細(xì)菌KCN抑制試驗(yàn)肌氨酸酐定量檢測(cè)試劑盒

人S100P鈣結(jié)合蛋白(S100P)ELISA試劑盒500G 78-5000 pg/mL二芐基二硫 Dibenzyl Disulfide >98.0%(GC)

人絲裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA試劑盒100mg 0.156-10 ng/mL4,8-二羥基喹啉-2-酸 XANTHURENIC ACID(RG)

CD147/EMMPRIN/Basigin抗體(FITC),鼠單抗25mgFCM   IF   ICC/IF  雙醋瑞因 DIACETYL RHEIN(P)

蝦特定基因序列(FC)核酸檢測(cè)試劑盒37271-17-3 20mgSennoside D HPLC≥98% 78-5000 pg/mL番瀉苷D;蕃瀉苷D

S100A7抗體,兔單抗 591-27-5 500mg 0.999IHC-P   3-Aminophenol

人Ⅸ型膠原α3(COL9α3)ELISA試劑盒27215-14-1 20mg neoandrographolide 0.156-10 ng/mL穿心蓮新苷

IL10RB/IL-10RB抗體,兔多抗,抗原親和純化62319-70-4HPLC≥98%ArjunglucosideⅡBRELISA   阿江欖仁樹(shù)葡糖苷II

ELISAKitforHumanProcollagengalactosyltransferase1191729-43-8 20mg Tenacissoside G 0.156-10 ng/mL通關(guān)藤苷G

人整合素α5(ITA5)ELISA試劑盒18842-98-310mg paederosidie acid 0.156-10 ng/mL雞屎藤苷酸

人胃脂肪酶(LIPF)ELISA試劑盒100mg 31.2-2000 pg/mL2-羥基肉桂酸 COUMARIC ACID, 2-(RG)

接種測(cè)試微生物瓊脂培養(yǎng)基1g 5g 25g 250g大黃素

ELISAKitforHumanPregnancy-specificbeta-1-glycoprotein11g 15.6-1000 ng/mLN-乙酰青霉胺 ACETYL-DL-PENICILLAMINE, N-(RG)(PLEASE CALL)

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)大豆苷元 HPLC≥98% A0008 S100A3抗體,兔多抗 20mg/支

CHES  10g 霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)

雷內(nèi)酯；山海棠素  HPLC≥98% Triptophenolide 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞，COLO320HSR細(xì)胞 用于含量測(cè)定

原薯蕷皂苷 20mg  Protodioscin ELISAKitforHumanChromogranin-A

去氫木香內(nèi)酯 DEHYDROCOSTUS LACTONE(RG)  5mg CD146/MCAM抗體(PE),鼠單抗

矢車(chē)菊素 CYANIDIN CHLORIDE(P)  25mg ACOT2抗體,兔多抗,抗原親和純化

北升麻寧 C14H20O8 Cimidahurinine CEACAM6/CD66c抗體,鼠單抗 HPLC≥98%

4-氨基偶氮苯  100mg  0.982 EGR1抗體,兔多抗,抗原親和純化