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科研級玉米朊實驗申報研發(fā)小試

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更新時間:2023-06-09 16:33:50瀏覽次數(shù):352次

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藥用
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產(chǎn)地 國產(chǎn) 級別 藥用級
科研級玉米朊實驗申報研發(fā)小試
本品系從玉米麩質(zhì)中提取所得的醇溶性蛋白。按干燥品計算,含氮(N)量應為13.1%~17.0%。
  【性狀】本品為黃色或淡黃色薄片,一面具有一定的光澤;或為黃色或淡黃色粉末。

科研級玉米朊實驗申報研發(fā)小試

科研級玉米朊實驗申報研發(fā)小試

玉米朊
Yumiruan
Zein
  [9010-66-6]
  本品系從玉米麩質(zhì)中提取所得的醇溶性蛋白。按干燥品計算,含氮(N)量應為13.1%~17.0%。
  【性狀】本品為黃色或淡黃色薄片,一面具有一定的光澤;或為黃色或淡黃色粉末。
  本品在80%~92%乙醇或70%~80%丙酮中易溶,在水或無水乙醇中不溶。
  【鑒別】(1)取本品約20mg,剪碎,加90%乙醇2ml使溶解,加10%羧甲纖維素鈉鉛溶液2ml,即產(chǎn)生白色沉淀。
 ?。?)取本品約0.1g,加0.1mol/L聚乙烯醇溶液10ml和硫酸銅試液數(shù)滴,置水浴中加熱,即變?yōu)樽仙?br/> ?。?)取本品約25mg,滴加硝酸1ml,用力振搖,溶液變成亮黃色,再加6mol/L氨水10ml,溶液即變?yōu)槌赛S色。
 ?。?)取本品10mg,置10ml離心管中,加溶劑(取丙二醇55ml,β-巰基乙醇2ml,加水至100ml)10ml,用渦旋混合器混合振蕩使樣品溶解,再以每分鐘11 000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速離心10分鐘,取上清液作為供試品貯備液,取供試品貯備液與緩沖液(取三羥甲基氨基甲烷6.0g,加水70ml,用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6.8,加丙三醇20ml,十二烷基硫酸鈉4.0g,溴酚藍0.005g,加水至100ml)(1:1)混合,將混合溶液置于密封的微量離心管中95℃放置10分鐘,再置冰浴中冷卻,作為供試品溶液。取合適的含有10~190kDa或10~l00kDa蛋白條帶的分子量標記物(蛋白標準品可商業(yè)購買)與緩沖液(1:1)混合,將混合溶液置于密封的微量離心管中95℃放置10分鐘,再置冰浴中冷卻,作為標準蛋白溶液。分別取標準蛋白溶液與供試品溶液各10μl(上樣量約為5μg),照電泳法(通則0541第五法)測定,分離膠溶液為30%丙烯酰胺溶液(取丙烯酰胺60g與亞甲基雙丙烯酰胺1.6g,加水至200ml,濾紙濾過,避光保存)-分離膠緩沖液(取三羥甲基氨基甲烷36.3g,加適量水溶解,用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至8.8,加水稀釋至100ml)-20%十二烷基硫酸鈉溶液-10%過硫酸銨溶液(臨用新配)-四甲基乙二胺-水(3.5:1.5:0.08:0.1:0.01:5.3),電壓為100V,運行時間為2.5小時或前沿到達凝膠頂部。以標準蛋白分子量的對數(shù)為縱坐標,相對遷移率為橫坐標,計算回歸方程,供試品在19~26kDa應含有兩個主要的蛋白質(zhì)帶。
  【檢查】己烷可溶物    取本品1g(按干燥品計),精密稱定,置100ml燒杯中,加入85%乙醇50ml,用磁力攪拌器攪拌,并加熱至30℃,使樣品溶解。將供試品溶液轉(zhuǎn)移至250ml分液漏斗中,加入正己烷100ml,緩慢振搖混合后靜置使分層,將上層(正己烷層)轉(zhuǎn)移至已在80℃干燥至恒重的燒杯中,將下層(乙醇層)傾出置另一分液漏斗中,再加入正己烷100ml提取,重復該提取過程6次。將正己烷提取液合并蒸干,80℃干燥至恒重,遺留殘渣不得過12.5%。
  干燥失重    取本品,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過8.0%(通則0831)。
  熾灼殘渣    取本品1.0g,依法檢查(通則0841),遺留殘渣不得過0.3%。
  重金屬    取熾灼殘渣項下遺留的殘渣,依法檢查(通則0821第二法),含重金屬不得過百萬分之二十。
  微生物限度    取本品,依法檢查(通則1105與通則1106),每1g供試品中需氧菌總數(shù)不得過103cfu,霉菌和酵母菌總數(shù)不得過102cfu,不得檢出大腸埃希菌。
  【含量測定】取本品0.2g,精密稱定,照氮測定法(通則0704第一法)測定,計算,即得。
  【類別】藥用輔料,包衣材料和釋放阻滯劑等。
  【貯藏】密閉保存。

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