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當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>PCR試劑盒>>熒光PCR>> AP3408tE9基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 級別 | 其他 |
|---|
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
tE9基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） | 48T | AP3408 |
【檢測方法】
1 ． 試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
將試劑盒各組分置4℃避光融化，充分混勻后瞬間離心。計算試劑使用份數(shù) N（N=樣本數(shù)+1 管陽性對照+1 管陰性對照），根據(jù)下表配置反應(yīng)體系mix，加入一適當(dāng)體積離心管中，充分混勻后瞬間離心，按 20μL 分裝至 PCR 反應(yīng)管/板，并轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
組分 | 體積（μL ） |
qPCR 預(yù)混液（含酶） | 16 |
引物探針 | 4 |
總體積（反應(yīng)體系 mix ） | 20 |
2 ． 樣本處理（樣本處理區(qū)）
① 核酸提取
選擇合適的盒提取核酸，具體按照相應(yīng)的試劑盒說明書操作。
② 加樣
在已加入反應(yīng)體系mix 的 PCR 反應(yīng)管/板上分別加入處理好的待檢標(biāo)本核酸、陰性對照、陽性對照各 5μL，終體積為 25μL。
蓋緊管蓋或封膜，瞬間低速離心后置熒光 PCR 檢測儀擴(kuò)增。
3 ． 擴(kuò)增檢測（核酸擴(kuò)增區(qū)）
步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
①預(yù)變性 | 95℃ | 5min | 1cycle |
②變性 退火/延伸/檢測熒光 | 95℃ 55℃ | 10s 40s | 40cycles |
【注意事項】
1．PCR 操作各階段應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)操作，避免交叉污染。
2．試劑盒各組分使用前應(yīng)充分融化混勻，離心數(shù)秒后使用。
3．各組分不得與其他產(chǎn)品或不同批號的相應(yīng)成分進(jìn)行互換。
4．待測標(biāo)本若不及時檢測，應(yīng)保存于-20℃或-70℃。
5．樣品的處理應(yīng)該嚴(yán)格按照生物安全規(guī)范操作。
6．PCR 操作人員應(yīng)具有經(jīng)驗和受過專業(yè)培訓(xùn)。
7．本試劑盒僅用于科研使用，不做為臨床診斷使用。
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