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產(chǎn)地 | 進口 | 產(chǎn)品新舊 | 全新 |
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自動化程度 | 其他 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Campylobacter coliPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
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反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
單料糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管)BR,2500~7000u/mg,牛血 10ml*20支/包超物歧化酶/過物歧化酶
人O6基鳥嘌呤DNA基轉(zhuǎn)移酶(MGMT)ELISA試劑盒1g 0.156-10 ng/mL3-氧基苯 ANISALDEHYDE, 3-(RG)
卻普曼瓊脂2.04716.462 250g德國德樂Dohler NBB-粉(NBB-P)
ELISAKitforHumanProstaglandinG/Hsynthase15mg 0.312-20 ng/mL白當歸素 BYAKANGELICIN(P)
Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)/Campy-CefexAgarBase咨詢用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)結(jié)晶紫
大鼠腎小球系膜細胞,HBZY-1細胞無1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶容量法雙組元卡爾費休試劑
難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)520-27-4 20mgDiosimin HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL地奧司明;香葉木苷; 布枯苷; 3',5,7-三羥基-4'-氧基黃-7-蕓香糖甙
CD112/Nectin-2/PVRL2抗體(PE),兔單抗20mg/支HPLC≥98%73-03-0FCM 蟲草素
ELISAKitforHumanC-Cmotifchemokine26020-18-4 20mgCoptisine chloride HPLC≥98% 15.6-1000 pg/mL鹽酸黃連堿;黃連堿
FGF10/KGF2抗體,兔多抗,抗原親和純化51317-08-9HPLC≥98%A054920mg/支ELISA β-桉葉
人外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)ELISA試劑盒3570-62-510mg 5-hydroxy-7,8-dimethoxyflavone 0.156-10 ng/mL5-羥基-7,8-二氧基黃
Biotinidase/biotinase/BTD抗體,兔多抗88901-36-4C60H102O29Mogroside Ⅴ≥98%ELISA 羅漢果甜苷Ⅴ
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)9029-22-5 250g肌氨酸酶(EC 1.5.3.1)
M17肉湯10ml 250gGlutaraldehybe Soution 二
人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒250uL 78-5000 pg/mLCONYRIN(RG)
全胃蛋白胨25322-69-4BR聚丙二標準品 25322-69-4
大腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒價格4-溴苯酸 4-Bromobenzoic Acid >98.0%(GC&T) 25G 人單胺酶(MAO)ELISA試劑盒
花旗松素;黃杉素,紫杉葉素,二氫槲皮素、蚊母樹素 HPLC≥98% Taxifolin 人膀胱成纖維細胞 用于含量測定
雷公藤乙素 20mg Tripdiolide 人牙本質(zhì)唾液磷酸蛋白(DSPP)ELISA試劑盒
American Ginseng (Panax quinquefolius) Root Extract #5 BXL(REQUEST QUOTE) 1mg ELISAKitforHumanNuclearreceptorsubfamily1groupImember3
地膚子皂苷Ic C41H64O13 Momordin Ic CGREF1抗體,兔多抗 ≥98%
七水硫酸鋅(ZnSO4 ?7H2O)7446-20-0 7446-20-0 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨MUG培養(yǎng)基/月桂基硫酸鹽胰蛋白胨4-基傘形葡糖苷酸培養(yǎng)基/LST-MUGMedium
青蒿乙素 10mg Arteannuin B ELISAKitforEndotoxin
苯酸乙酯 BENZOIC ACID ETHYL ESTER(SG) 1g 人RaIBP1內(nèi)含Eps域相關(guān)蛋白2(REPS2)ELISA試劑盒
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