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產(chǎn)地 | 進口 | 產(chǎn)品新舊 | 全新 |
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自動化程度 | 其他 |
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
特點:
高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 比氏腸微孢蟲PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Enterocytozoon bieneusi PCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
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反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
ELISAKitforHumanC-X-Cchemokinereceptortype45058-13-9 20mg Columbianadin 15.6-1000 pg/mL二氫歐山芹當歸酸酯
CarbonicAnhydraseIII/CA3抗體,鼠單抗7437-54-9A0735ELISA 基辛弗林
人HLAⅡ類組織相容性抗原DRβ5鏈(DRB5)ELISA試劑盒620-61-1 20mg Hyoscyamine sulfate hydrate 1.56-100 ng/mL硫酸天仙子胺水合物
AFM/Afamin抗體,兔多抗,抗原親和純化87480-46-4C44H70O17Liriope muscari baily saponins C≥98%ELISA 短葶山麥冬皂苷C
ELISAKitforHumanLeukotrieneC4synthase100mg 78-5000 pg/mL1-十六烷/鯨蠟 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG)
磷酸鹽緩沖液(pH7.2)100ml/500ml 250g改良型石炭酸復紅染液(苯品紅染液)
人前列腺雄激素調(diào)節(jié)粘蛋白樣蛋白1(PARM-1)ELISA試劑盒1mg 0.312-20 ng/mLGoldenseal (Hydrastis canadensis) Rhizome Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎/BufferedListeriaEnrichmentBroth25174李氏菌的增菌培養(yǎng)wako 68-12-2 N,N-Dimethylformamide
ELISAKitforHumanTGF-betareceptortype-21g 0.156-10 ng/mL硝阿托品 ATROPINE METHYL NITRATE(P)
甘氨酸培養(yǎng)基5g 250gLipase 脂肪酶
Cadherin-12/CDH12抗體,兔單抗25mgELISA 鹽酸環(huán)胞苷 CYCLOCYTIDINE HCL(RG)
人α-淀粉酶1(Alpha-amylase1)ELISA試劑盒491-70-3 20mgLuteolin HPLC≥98% 78-5000 pg/mL木犀草素;木樨草素;3',4',5,7-四羥基黃;藤黃菌素
CLEC4D抗體,兔多抗518-17-2HPLC≥98%A026620mg/支ELISA 吳茱萸堿
ELISAKitforHumanC-Cmotifchemokine2071963-77-4 20mg Artemether 0.156-10 ng/mL蒿
CD19抗體(FITC),鼠單抗127-91-3C10H16beta-Pinene≥98%FCM β-蒎
人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒119760-73-510mg Baohuoside VI 78-5000 pg/mL寶藿苷VI
比氏腸微孢蟲PCR檢測試劑盒價格71989-28-1 | Fmoc-Met-OH|南京肽業(yè) 71989-28-1 SCHAEDLER瓊脂/SCHAEDLER厭氧菌瓊脂/SCHAEDLERAgar
甘草苷;甘草黃苷,甘草黃,甘草根亭,甘草素-4′-β-葡萄糖苷 20mg Liquiritin 白脂素(Asprosin)ELISA試劑盒 HPLC≥98%
ACONITINE(P) 5mg PIGR/Poly-Igreceptor抗體,兔多抗
膽固油酸酯 CHOLESTERYL PALMITATE(RG) 100mg 人唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素10(Siglec-10)ELISA試劑盒
丹參I HPLC≥98% A0059 LRPAP1/A2MRAP抗體,兔單抗 20mg/支
溴代十六烷基啶/溴化十六烷基啶 100g 胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)顆粒
溴藍 Bromophenol Blue 25G CD89/FCAR抗體(PE),鼠單抗
丁香酸 20mg Syringic acid ELISAKitforMouseC-X-Cmotifchemokine15
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