5min極速RNA提取試劑盒 返回列表頁

本試劑盒采用的裂解液，可快速可靠的從細(xì)胞、動物組織、植物組織、病毒液樣本、抗凝全血、培養(yǎng)細(xì)菌中純化出高純度的總 RNA。該試劑盒是目前國際上操作步驟最少、用時(shí)最短的 RNA 提取試劑盒（最快 5 分鐘）。應(yīng)用本試劑盒提取的 RNA 可直接用于反轉(zhuǎn)錄、基因克隆、定量檢測、文庫構(gòu)建、雜交等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：
(1) 本試劑盒中的 Washing Buffer 中已經(jīng)加乙醇，無需單獨(dú)添加。
(2) RNA LB1 和 RNA BB2 均具有腐蝕性，注意防護(hù)。操作方法
（1）裂解/上柱（1.5ml EP 管中處理）培養(yǎng)細(xì)胞：消化完畢后，離心收集細(xì)胞沉淀，用 20~30μl 水或PBS 重懸細(xì)胞沉淀（務(wù)必重懸充分）。加入 120μl RNA LB1 漩渦混勻 30s(有未溶解的細(xì)胞團(tuán)塊，用槍頭吹打，助溶解)，加入 500μlRNA BB2 上下顛倒混合均勻，倒入吸附柱中。13000rpm 離心 30s，倒掉廢液，進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
組織樣品----采用研缽進(jìn)行研磨：用液氮研磨粉碎組織樣本，將研磨粉碎的樣品加入到 200μl RNA LB1 中，漩渦混合均勻 1min（有塊狀組織未溶解的，要使用槍頭吹打，助消化），加入 500μl RNABB2 上下顛倒混合均勻，13000rpm 離心 15s。將上清倒入吸附柱中（動作需輕柔，勿將未消化的組織塊倒入吸附柱），13000rpm 離心 30s，倒掉廢液，進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
組織樣品----采用鋼珠進(jìn)行研磨：將組織樣品加入到 300μl RNALB1 中（1.5ml EP 管），并加入幾粒鋼珠，置于組織研磨儀中，研磨 1~2min。向研磨后的勻漿液中加入 750μl RNA BB2，漩渦混勻5s，13000rpm 離心 1min。用 1ml 吸頭吸取 750μl 上清液到吸附柱中。13000rpm 離心 30s，倒掉廢液，進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。注意：植物組織的勻漿效果通常較動物組織差一些，所以一般推薦采用液氮條件下研缽來研磨。在采用鋼珠研磨的條件下務(wù)必將組織研磨粉碎，否則會導(dǎo)致產(chǎn)率降低。病毒液 /體液 /血清 /血漿：吸取 150μl 病毒液/體液樣品到加入到120μl RNA LB1 中，漩渦混合均勻 30s。直接加入 500μl RNA BB2中，漩渦混合均勻 15s。倒入吸附柱中，13000rpm 離心 30s，倒掉廢液，進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
培養(yǎng)細(xì)菌：收集菌體后，用 20~30μl 水重懸菌體（務(wù)必重懸充分），加入 120μl RNA LB1 漩渦混勻 30s，加入 500μl RNA BB2 上下顛倒混合均勻，倒入吸附柱中。13000rpm 離心 30s，倒掉廢液，進(jìn)行后續(xù)洗滌/洗脫步驟。
（2） 洗滌和洗脫
向吸附柱中加入 500μl Washing Buffer，13000rpm 離心 15s。重復(fù)此步驟一次。 將吸附柱重新放回離心機(jī)，13000rpm 空離心1min，將殘留的乙醇甩干。 將吸附柱芯放入到 2mL NucleaseFree 收集管中，向吸附柱芯中加入 20~50μl Nuclease Free H2O，室溫放置 1min，13,000rpm 離心 1min，洗脫液即為提取的 RNA，冷凍保存。