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上海李記生物科技有限公司>>qPCR,RT-PCR>>pfu Plus DNA高保真聚合酶>>D1010L1174pfu Plus DNA高保真聚合酶

pfu Plus DNA高保真聚合酶

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  • pfu Plus DNA高保真聚合酶

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  • 型號 D1010L1174
  • 品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市

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更新時間:2017-12-26 13:08:59瀏覽次數(shù):794

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產(chǎn)品簡介

李記生物研發(fā)的pfu Plus DNA高保真聚合酶是新一代Pfu高保真聚合酶,同時具有3’→5’外切酶活性(校對功能),和DNA擴(kuò)增高效性。Pfu-Plus DNA聚合酶的錯誤率為0.25×10-6,比Taq DNA聚合酶低100倍,比Pfu DNA聚合酶低10倍,它能產(chǎn)生平末端PCR產(chǎn)物。Pfu-Plus DNA polymerase每kb延伸僅需要15~30秒,比KOD-Plus高保

詳細(xì)介紹

pfu Plus DNA高保真聚合酶

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

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價格(元)

pfu Plus DNA高保真聚合酶

D1010L1174

250 U

-20℃

400

D1010L1175500 U-20℃

750

D1010L11761000 U-20℃

1350

產(chǎn)品描述

用于PCR的DNA polymerase大致可分為2大類。一類是從嗜熱菌中分離出來的被稱為polⅠ型的聚合酶,以Taq、Tth DNA polymerase為代表。另一類是從超嗜熱Archaea中分離出來的被稱為α型的聚合酶,如KOD、Pfu DNA polymerase屬于該類。α型酶具有polⅠ型酶所沒有的3'→5核酸外切酶活性。該活性被稱為Proof-reading(校正)活性,是PCR反應(yīng)高保真性的原因。

李記生物研發(fā)的Pfu Plus DNA polymerase是新一代Pfu高保真聚合酶,同時具有3→5外切酶活性(校對功能),和DNA擴(kuò)增高效性。Pfu-Plus DNA聚合酶的錯誤率為0.25×10-6,比Taq DNA聚合酶低100倍,比Pfu DNA聚合酶低10倍,它能產(chǎn)生平末端PCR產(chǎn)物。Pfu-Plus DNA polymerase每kb延伸僅需要15~30秒,比KOD-Plus高保真酶快1倍,比普通Pfu 酶快4-6倍。

Pfu-Plus DNA聚合酶在擴(kuò)增長度10kd以內(nèi)的DNA片段均表現(xiàn)優(yōu)異。Pfu-Plus DNA polymerase適用于點(diǎn)突變及長片段或有難度的PCR應(yīng)用。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸,收到貨后-20℃避光干燥保存,避免反復(fù)凍融,保存條件下1年有效。

使用方法

*PCR反應(yīng)體系(50 μL)

5 X HF PCR反應(yīng)緩沖液

10 μL

Pfu-Plus DNA聚合酶(2.5 U/μL)

0.4~2 μL

dNTP mix, 2 mM each

5 μL

DNA模板(10 pg-1 μg)

0.5 μL

Forward Primer (10 μM)

5 μL

Reverse Primer (10 μM)

5 μL

ddH2O

補(bǔ)體積至50 μL

 

*PCR反應(yīng)條件

初始變性

94-96℃,1-3 min

 

變性

94-96℃,20 sec

25-30個循環(huán)

退火

Tm ± 3

延伸

72℃,15-30 sec/kb

zui后延伸

72℃,15-30 sec/kb

 

 

注:上述建議反應(yīng)體系及反應(yīng)條件僅供參考,某些實驗可能需要進(jìn)一步優(yōu)化以獲得*效果。

應(yīng)用實例

 

圖1:100μL反應(yīng)體系,1個單位Pfu Plus DNA聚合酶,延伸3分鐘。

lane1:4kb, lane2:1.4kb, lane3-10:7-8 kb.

 

圖2:100 μL反應(yīng)體系,逐級降低 Pfu-Plus DNA聚合酶用量,延伸20秒。

Lane1:20U, Lane2:10U, lane3:5U, lane4:2.5U, lane5:1.25U, lane6:0.63U, lane7:0.31U.

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