服務(wù)要求
1. 請您提供新鮮的且盡量多的材料(各種材料的 RNA 提取量請參照“總 RNA 的提取” ) ,或直接提供純化好的 總 RNA 。每次實驗操作所需的 RNA 量為 1 ~ 5 m g ,如果您的實驗需要進(jìn)行多次 RACE 操作,則應(yīng)視具體情況相應(yīng)增加樣品量。
2. 請通過 提供已知部分的 cDNA 序列及方向。
3. 請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料: RNA 來源、純度、豐度、所擴(kuò)增基因的估計長度、是否具有同源序
操作程序
2. 設(shè)計引物通過 RT-PCR 對已知 cDNA 序列進(jìn)行驗證。
3. 驗證成功后,根據(jù) cDNA 序列設(shè)計引物進(jìn)行 RACE 操作。
4. 擴(kuò)增出來的片段克隆到普通載體中測序(或 PCR 產(chǎn)物直接測序 ) 。
5. 分析結(jié)果,根據(jù)您的要求決定是否繼續(xù)設(shè)計引物進(jìn)行下一次 RACE 操作。
6. 實驗完成后,將為您提供完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告、測序結(jié)果以及測序彩色峰圖、引物、質(zhì)粒以及含有該質(zhì)粒的 菌種(穿刺菌)等。