計(jì)數(shù)方法
計(jì)數(shù)方法包括平皿法、薄膜過(guò)濾法和可能數(shù)法(Most-Probable-Number Method,簡(jiǎn)稱(chēng)MPN 法)。MPN 法用于微生物計(jì)數(shù)時(shí)精確度較差,但對(duì)于某些微生物污染量很小的供試品,MPN 法可能是更適合的方法。
供試品的檢查
按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的計(jì)數(shù)方法進(jìn)行供試品中需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的測(cè)定。胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基用于測(cè)定需氧菌總數(shù);沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于測(cè)定霉菌和酵母菌總數(shù)。
陰性對(duì)照試驗(yàn) 以稀釋劑代替供試液進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn),陰性對(duì)照試驗(yàn)應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。如果陰性對(duì)照有菌生長(zhǎng),應(yīng)進(jìn)行偏差調(diào)查。
薄膜過(guò)濾法
除另有規(guī)定外,按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備。取相當(dāng)于1g、1ml 或10cm2 供試品的供試液,若供試品所含的菌數(shù)較多時(shí),可取適宜稀釋級(jí)的供試液,照方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法加至適量稀釋液中,立即過(guò)濾,沖洗,沖洗后取出濾膜,菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 培養(yǎng)條件和計(jì)數(shù)方法同平皿法,每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超過(guò)100cfu。
菌數(shù)報(bào)告規(guī)則 以相當(dāng)于 1g、1ml 或10cm2 供試品的菌落數(shù)報(bào)告菌數(shù);若濾膜上無(wú)菌落生長(zhǎng),以﹤1 報(bào)告菌數(shù)(每張濾膜過(guò)濾1g、1ml 或10cm2 供試品),或﹤1 乘以低稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。
結(jié)果判斷
需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的總菌落數(shù)(包括真菌菌落數(shù));霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的總菌落數(shù)(包括細(xì)菌菌落數(shù))。若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌使霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)結(jié)果不符合微生物限度要求,可使用含抗生素(如氯霉素、慶大霉素)的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或其他選擇性培養(yǎng)基(如玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基)進(jìn)行霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定。使用選擇性培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查。若采用MPN 法,測(cè)定結(jié)果為需氧菌總數(shù)。
各品種項(xiàng)下規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)解釋如下:
101cfu: 可接受的大菌數(shù)為20;
102cfu: 可接受的大菌數(shù)為200;
103cfu: 可接受的大菌數(shù)為2000:依此類(lèi)推。
若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的檢查結(jié)果均符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定,判供試品符合規(guī)定;若其中任何一項(xiàng)不符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定,判供試品不符合規(guī)定。
關(guān)于Milliflex Plus 全自動(dòng)微生物過(guò)濾系統(tǒng)
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