硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基
作用:主要用于培養(yǎng)需氧、厭氧和微需氧微生物,是培養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基在藥典中一直被用作無菌檢查培養(yǎng)基,具有重要的作用。
原理:硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的主要成分:胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化鈉、 L-胱氨酸(半胱氨酸鹽酸鹽)、硫乙醇酸鈉(硫乙醇酸 0.6 mL)、瓊脂、刃天青等。
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基
其中胰酪蛋白胨、酵母浸出粉提供氮源以及供合成蛋白質(zhì)必須的各種氨基酸和生長因子,葡萄糖提供碳源及能源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;胱氨酸、硫乙醇酸鹽、葡萄糖均可降低氧化還原電位的作用,防止過氧化物的積累對某些菌產(chǎn)生毒性,有利于厭氧菌的生長,另外,硫乙醇酸鹽有鈍化含砷和汞類藥物及其他金屬防腐劑的有害作用;刃天青作為氧化還原的指示劑,氧化時呈紅色,以此指示培養(yǎng)基的氧化還原電位;瓊脂可以防止液體對流,即防止二氧化碳、氧氣和還原產(chǎn)物的擴散,有利于厭氧環(huán)境的形成。
特點:從硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的成分分析可以總結出該培養(yǎng)基的特點主要有:
含有較全面的營養(yǎng),能滿足絕大多數(shù)細菌的營養(yǎng)需求;
培養(yǎng)基的不同深度上層、中層、下層部位可以分別模擬提供有氧、弱氧至無氧不同氧含量的梯度環(huán)境,使厭氧細菌、兼性厭氧細菌、好氧菌均可在此培養(yǎng)基中生長;
成份相對簡單,制作簡便;
含少量瓊脂,流動性與普通液體培養(yǎng)基有區(qū)別。
使用時的注意事項:制作硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基時,需要注意以下問題:
有少量的的瓊脂,在滅菌后,培養(yǎng)基應呈現(xiàn)無渾濁狀態(tài),如果放置一段時間,出現(xiàn)輕微渾濁,尤其是放入冰箱后,渾濁現(xiàn)象更加明顯。渾濁程度一方面可能與培養(yǎng)基用的瓊脂質(zhì)量有關,另一方面也可能與滅菌是否*有關,應具體分析。如果是前者可考慮更換培養(yǎng)基廠家或批號、或者更換瓊脂,如果是后者則應檢查仔細滅菌操作和滅菌設備。
培養(yǎng)基在滅菌后至使用過程中取放應避免搖晃,以免培養(yǎng)基因振動而進入氧氣,影響培養(yǎng)基的使用,接種操作應動作迅速、敏捷,否則暴露在空氣中過長,培養(yǎng)基被氧化。
在接種前,氧化層的顏色 (粉紅色) 如果超過培養(yǎng)基深度的 1/5,須經(jīng)水浴煮沸加熱至粉紅色消失(不超過 20 min),并迅速冷卻。培養(yǎng)基加熱只限一次,以免培養(yǎng)基質(zhì)量下降。
刃天青應以新鮮配制為準,否則影響判斷。