利用斑馬魚模型評價Wnt信號通路抑制作用【評價原理】
Wnt是一種分泌的糖蛋白,發(fā)育調控的的wnt基因編碼分泌的糖基化蛋白質,作用于細胞表面,大多數(shù)的wnt基因在機體傷口修復和再生需要組成受傷組織的各種細胞類型之間做協(xié)調。
利用斑馬魚模型評價Wnt信號通路抑制作用【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分為體軸發(fā)育和斷尾再生兩種模型。
體軸發(fā)育評價分成兩組,分別是正常對照組和服用Wnt信號通路抑制劑組(Wnt信號通路抑制劑LGK974通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。服用一段時間Wnt信號通路抑制劑后,對斑馬魚體軸長度進行測量,觀察體軸長度的變化。
斷尾再生評價分成三組,分別是正常對照組、模型對照組和服用Wnt信號通路抑制劑組(Wnt信號通路抑制劑LGK974通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內)。服用一段時間Wnt信號通路抑制劑后,對斑馬魚尾鰭面積進行測量,觀察尾鰭再生的變化。
【結果展示】
圖1. 斑馬魚體軸發(fā)育表型圖
黑色箭頭所指為缺失的尾鰭
可以看到,服用Wnt信號通路抑制劑組的體軸長度較正常對照組明顯變短。
圖2. 斑馬魚尾鰭再生表型圖
紅色區(qū)域為向尾鰭再生部位
可以看到,服用Wnt信號通路抑制劑組的斑馬魚尾鰭再生面積相比模型對照組明顯變小。
【評價結論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用Wnt信號通路抑制劑的體軸長度和尾鰭再生面積均小于正常對照組。
2.本實驗證實了LGK974具有體軸發(fā)育和組織再生抑制作用,作用機制與抑制wnt信號通路相關。