利用斑馬魚模型評價多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用【評價原理】
中一個普遍存在的問題就是多藥耐藥。在引起的腫瘤耐藥機制中,腫瘤細胞的P-糖蛋白(P-gp)表達水平升高是主要機制之一。P-gp是一種細胞外轉(zhuǎn)運子,P-gp表達水平升高會導致進入腫瘤細胞會很快被轉(zhuǎn)運到細胞外,導致腫瘤細胞內(nèi)的藥濃度達不到殺死腫瘤細胞的濃度,進而產(chǎn)生耐藥性。
讓正常斑馬魚攝入熒光底物(呈紅色),由于P-gp的存在,正常斑馬魚將熒光底物泵出體外,殘留在體內(nèi)的熒光底物很少;而用P-gp抑制劑環(huán)孢菌素A處理后,P-gp的活性受到抑制,P-gp熒光底物不能被排出,殘留在斑馬魚體內(nèi)的熒光底物增多。若某種藥物能夠增加熒光底物在斑馬魚體內(nèi)的存留,則其可能是潛在的P-gp抑制劑。
利用斑馬魚模型評價多藥耐藥逆轉(zhuǎn)作用【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照組和服用P-gp抑制劑組。斑馬魚提前P-gp抑制劑數(shù)小時,而正常斑馬魚和服用P-gp抑制劑組都攝入了等量的熒光底物(熒光底物通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。一定時間后,觀察斑馬魚卵黃囊熒光底物的殘留情況(卵黃囊熒光強度)來體現(xiàn)P-gp抑制劑逆轉(zhuǎn)多藥耐藥作用。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚多藥耐藥表型圖
可以看到,服用P-gp抑制劑組的斑馬魚卵黃囊明顯比正常對照組的亮,說明其對P-gp有顯著的抑制作用。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用P-gp抑制劑組的斑馬魚卵黃囊明顯比正常對照組的亮,說明其對P-gp有顯著的抑制作用。
2.本實驗證實了環(huán)孢菌素A、維拉帕米具有逆轉(zhuǎn)多藥耐藥作用。