利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)保護(hù)心肌作用【評(píng)價(jià)原理】
心肌損傷多數(shù)是由于炎癥、缺血、冠狀動(dòng)脈狹窄等因素引發(fā)的心肌損傷,常表現(xiàn)為胸悶、胸痛、氣短、四肢乏力、心慌、嘔吐等癥狀。斑馬魚心臟包含心房、心室和靜脈竇,心電圖譜也與哺乳動(dòng)物類似。而且斑馬魚生長(zhǎng)發(fā)育周期短,胚胎透明易觀察,心臟在受精后48小時(shí)就發(fā)育*,有利于開展心肌損傷保護(hù)劑的研究。鹽酸異丙腎上腺素可以誘導(dǎo)斑馬魚心率加快,心肌持續(xù)收縮,心肌耗氧量持續(xù)增加,心臟由代償性收縮轉(zhuǎn)化為失代償,終導(dǎo)致心肌損傷,使心肌細(xì)胞凋亡。
經(jīng)過特異性熒光染色(凋亡細(xì)胞呈綠色),心肌損傷的斑馬魚在心臟部位會(huì)布滿凋亡細(xì)胞,可以明顯被觀察到。
利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)保護(hù)心肌作用【實(shí)驗(yàn)方案】
我們將受測(cè)試斑馬魚分成三組,分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用心肌保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未經(jīng)任何處理,模型對(duì)照組與服用心肌保護(hù)劑組都攝入了等量的鹽酸異丙腎上腺素(鹽酸異丙腎上腺素通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。服用心肌損傷保護(hù)劑組在攝入鹽酸異丙腎上腺素的同時(shí)攝入N-乙酰半胱氨酸之類的心肌保護(hù)劑。
服用一段時(shí)間心肌保護(hù)劑后,我們對(duì)斑馬魚整體進(jìn)行特異性熒光染色,觀察心肌細(xì)胞的凋亡情況。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚心肌保護(hù)表型圖
黃色虛線區(qū)域?yàn)樾呐K,綠色光點(diǎn)為凋亡細(xì)胞
可以看到,服用心肌保護(hù)劑組的心臟情況與正常對(duì)照組比較相似,細(xì)胞凋亡明顯比模型對(duì)照組減少。
【評(píng)價(jià)結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn),服用心肌保護(hù)劑組的心臟情況與正常對(duì)照組相似,并未出現(xiàn)模型對(duì)照組大量凋亡細(xì)胞的情況。
2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了N-乙酰半胱氨酸具有明顯保護(hù)心肌作用。