嵌合抗體（Chimeric Antibody）是指來源于一種物種的抗體可變區(qū)與另外一種物種的恒定區(qū)片段進行嵌合后形成完整的IgG抗體，如人-鼠，人-兔，鼠-兔，人-羊駝嵌合抗體等。不同物種的嵌合抗體改造主要是為了改善親本抗體的免疫原性，種屬特性，半衰期等特性，其核心訴求是獲得抗體的可變區(qū)序列，借助于噬菌體展示技術和酵母抗體展示技術，可以發(fā)現(xiàn)多種物種的單克隆抗體，進而獲得不同來源的嵌合抗體。
2014 年，WHO（世界衛(wèi)生組織）發(fā)布了新指南，重新定義了不同類別的治療性抗體。其 INN（國際非專有名稱）抗體藥物命名法將治療性抗體分為 3 類：嵌合型或"-ximab，人源化或"-zumab，全人源或"-umab。
根據(jù)世衛(wèi)組織命名法對特定抗體進行分類，來源于小鼠（或更普遍的非人類）序列的抗體將被歸類為-祖馬抗體，而來源于人類（噬菌體展示、轉基因小鼠或 B 細胞克隆技術）的抗體將被歸類為-烏馬單抗。在一個標準項目中，與 IMGT 數(shù)據(jù)庫進行 BLAST 的小鼠抗體通常會在 VL 結構域顯示出與較接近的人類種系約 65-80% 的同一性，在 VH 結構域顯示出 60-75% 的同一性。因此，要想在 VH 結構域達到所需的同一率，通常需要對 CDR 中的一些殘基進行突變。因此，在人源化過程中需要對 CDR（根據(jù) Kabat 的定義）進行突變，以達到 VH 結構域 85% 的同一性。
泰克生物是一家專業(yè)的嵌合抗體的構建與生產(chǎn)公司，擁有成熟的重組抗體哺乳表達平臺，能為客戶提供高質量的嵌合抗體表達定制服務。全套Gibco無血清哺乳細胞培養(yǎng)，配合來源清晰的293F，CHO懸浮細胞系，整個體系滿足于不同客戶對天然構象蛋白的體外重組表達需求。泰克生物為客戶提供的全套高性價比研究服務滿足GMP-like體系，包括細胞種子庫來源文件記錄體系、細胞種子批檢定，動物源成分的質控，標準化細胞培養(yǎng)與轉化操作流程等。
█ 嵌合抗體的分類
嵌合抗體種類 | 簡介 | 嵌合原理 |
嵌合IgG抗體 | 在免疫過程中，抗體Fc段能與效應細胞發(fā)生相互作用，從而發(fā)揮特異的生物學功能；IgG1和IgG3與Fc受體的結合能力較強，IgG4次之，IgG2幾乎檢測不到結合。 | 構建嵌合抗體首先需從生產(chǎn)鼠源單抗的雜交瘤細胞中得到V區(qū)基因，再與人類的C區(qū)基因重組并克隆到合適載體中，然后轉入受體細胞表達。 |
嵌合Fab和F（ab'）2抗體 | 該種抗體的優(yōu)勢是滲透力強，由于該類型抗體的親和力較低，分子量小，很容易被腎小球過濾而從血液中消失，因此，大多數(shù)不適合單獨用于臨床治療。 | 將功能性抗體L，H鏈的V區(qū)基因與人的輕鏈K和H進行重組，然后再轉入宿主細胞中表達。 |
█ 人鼠嵌合抗體構建策略
1.模板替換：與鼠對應部分有較大同源性的人抗體FR替換鼠FR，利用已有晶體結構數(shù)據(jù)的人源抗體的可變區(qū)框架（VH如NEW，KOL，VL如REI等)用作替換的基本模板或在已有的抗體序列庫中搜尋與鼠McAb FR有同源性的人源FR用于替換。
2.表面重塑：對鼠CDR及FR表面殘基進行鑲飾（veneering）或重塑（resurfacing），以使之類似于人抗體CDR的輪廓（profile）或人 FR 的型式。
3.補償變換：在人FR選擇與CDR有相互作用、與抗體的親和力有密切關系或對FR空間結構折疊起關鍵作用的殘基進行改變，以補償CDR移植。
4.定位保留：人源化McAb保留了鼠源McAb可變區(qū)中參與抗原結合的氨基酸殘基，包括CDR和FR中的一些關鍵殘基。
█ 嵌合抗體設計與表達服務周期
步驟 | 服務內(nèi)容 | 周期 |
基因克隆及載體構建 | * 擴增/鑒定基因片段或合成目的基因，插入哺乳動物細胞表達質粒 * PCR及測序檢測確定亞克隆基因 * 交付：測序數(shù)據(jù)和實驗方案 | 1-2周 |
瞬時蛋白表達 | * 重組質粒轉染細胞(293F， CHO) ：瞬時表達 * SDS-PAGE和WB檢測 * 交付：表達載體，克隆菌株，重組抗體，純度>85% | 2–3周 |
穩(wěn)定表達（可選） | * 重組蛋白CHO穩(wěn)定表達細胞系構建和篩選 * 交付：穩(wěn)定細胞系，構建報告；邊際產(chǎn)物，3個克隆，每個克隆50ml發(fā)酵產(chǎn)物及純化產(chǎn)物 | 12–14周 |
█ 泰克服務優(yōu)勢
? 可變區(qū)多種屬選擇：人、小/大鼠、犬、雞、駱駝等
? 免費重組嵌合抗體表達方案設計
? 有自主優(yōu)化的HEK293/CHO平臺能夠進行更好的糖基化及翻譯后修飾
? 自主設計哺乳體系表達載體
? 過重規(guī)格的放大表達體系可供選擇
? 恒定區(qū)有多種屬選擇：人、大/小鼠、犬、恒河猴、兔等
? 具有多亞型構建的經(jīng)驗：IgG、IgA、IgM和IgE
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