斑馬魚模型評價肝臟毒性【評價原理】
斑馬魚的基因與人類基因的相似度達到87%,斑馬魚肝臟中有許多與哺乳動物同源的脂質(zhì)代謝酶,與哺乳動物對外源化學物質(zhì)的防御機制相當,包括酶的誘導和氧化應(yīng)激。而且斑馬魚幼魚通體透明,容易觀察到毒性表型。
我們評價斑馬魚肝臟毒性有4個指標:1.肝臟面積;2.肝臟變性程度;3. 卵黃囊吸收延遲的發(fā)生率(卵黃囊是脂肪,卵黃囊吸收與肝功能密切相關(guān));4. 肝臟病理切片。
斑馬魚模型評價肝臟毒性【實驗方案】
我們將受測試斑馬魚分成兩組,分別是正常對照和服用/注射供試品組(供試品通過溶解到養(yǎng)魚用水中或注射的方式攝入到斑馬魚體內(nèi))。
服用/注射藥物一段時間后,我們觀察斑馬魚肝臟及卵黃囊表型,同時制作成病理切片觀察肝臟的病理結(jié)構(gòu)變化。
【結(jié)果展示】
圖1. 斑馬魚肝臟毒性表型圖
可以看到,服用/注射供試品組斑馬魚肝臟腫大、變性、卵黃囊吸收延遲。
圖2. 斑馬魚肝臟病理切片
綠色箭頭指向紅細胞淤積
從病理切片中可見,正常對照組肝組織結(jié)構(gòu)規(guī)則,肝細胞形態(tài)完整,細胞質(zhì)均勻,細胞核呈規(guī)則圓形,位于細胞中央;服用/注射供試品組的斑馬魚肝臟紅細胞淤積嚴重,細胞腫脹現(xiàn)象嚴重,細胞核變形,位于細胞邊緣,局部可見炎性浸潤,壞死。
【評價結(jié)論】
1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗,服用/注射供試品組的斑馬魚肝臟產(chǎn)生明顯的毒性表型且組織病理學改變,與正常對照組存在明顯的差別。
2.本實驗證實了該供試品對斑馬魚有肝臟毒性。