溫州魚(yú)皮膠原蛋白生產(chǎn)線酸法
酸法提取是利用一定濃度的酸溶液在一定的條件下提取膠原蛋白,主要采用低離子濃度酸性條件破壞分子酸提取膠原蛋白間 鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解,采用酸法提取的膠原蛋白通常成為酸溶性膠原蛋白。酸溶解法可將沒(méi)有交聯(lián)的膠原分子溶解出來(lái),也可溶解含有醛胺類(lèi)交聯(lián) 鍵的膠原纖維,然后釋放到溶劑中。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用低溫酸法提取的膠原zui大程度的保持了其三螺旋結(jié)構(gòu),適用于科研生物材料及原 料的制備。通常的做法是將適當(dāng)濃度的酸液按一定料液比加入到經(jīng)過(guò)預(yù)處理的骨粉中,于0~25℃攪拌提取一定時(shí)間。在采用酸法進(jìn)行膠原蛋白的提取時(shí),注意提 取溫度不宜過(guò)高,以免膠原蛋白的生物活性發(fā)生破壞。取樣經(jīng)前處理后,勻漿在低溫下用酸浸提,離心即可得酸溶性膠原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸、磷酸、甲酸、乙酸、蘋(píng)果酸、檸檬酸等,但大多數(shù)研究集中于乙酸抽提,像Maria Sadowska等用0.5mol/L檸檬酸在室溫下提取骨膠原蛋白,其提取率略低于乙酸提取。檸檬酸因不產(chǎn)生顏色和異味得以廣泛使用于食品工業(yè)的膠原蛋 白的提取。
酸法處理時(shí),反應(yīng)強(qiáng)烈,水解*,多生成氨基酸混合物,而且使用酸提取時(shí),根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時(shí)間等條件的 不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在即使中等濃度酸*水解過(guò)程中色氨酸也會(huì)全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會(huì)部分被破壞,且設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。因 此,酸法溶出生物科研膠原要準(zhǔn)確控制酸度、溫度、時(shí)間等影響因素。由于各種不足,酸法很少單獨(dú)使用,一般和酶法配合。比如以豬皮為原料,在檸檬酸 (pH8.6)和胃蛋白酶協(xié)同下提取膠原蛋白。在處理后的豬皮中加0.05moL/L含有胃蛋白酶的檸檬酸溶液(pH2.5-3)處理一段時(shí)間,然后再用 NaCL鹽析,zui后提取率為12.35%,提取物保持了完整三股螺旋結(jié)構(gòu)的I型膠原蛋白。還有人以雛雞胸軟骨為原材料,在0.5moL/L醋酸條件下經(jīng)胃 蛋白酶多次消化,在4℃,20000r條件下離心20min,zui后應(yīng)用DEAE-Sephadex A-50進(jìn)行離子交換層析,之后透析,再用NaCL鹽析,之后得到純化的膠原蛋白Ⅱ型。
溫州魚(yú)皮膠原蛋白生產(chǎn)線
膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,根據(jù)溶劑 的不同,可分為熱水浸提法、酸法、堿法、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法。
在實(shí)際提取過(guò)程中,不同提取方法之間往往相互結(jié)合,可以得到較好的提取效果。采用超高壓處理系統(tǒng)對(duì)原料給予高壓處理一段時(shí)間,使其組織結(jié)構(gòu)和膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生松弛、變性,便于分離提取。 水法熱水提取法是將原料經(jīng)過(guò)除雜蛋白等前處理之后,在一定條件下直接用熱水浸提已經(jīng)變性了的膠原蛋白或水提取膠原蛋白膠原蛋白水解物,使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-45℃。