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貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321211 | 淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒(比色法) | 100管/48樣 |
AS6321211 | 淀粉分支酶(SBE)測(cè)試盒(比色法) | 50管/24樣 |
測(cè)定意義
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測(cè)定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
測(cè)定原理
直鏈淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE使直鏈淀粉含量減少,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值,一定時(shí)間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的的儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1支,4℃保存;臨用前每支加入1mL蒸餾水,95℃沸水浴充分溶解后備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體13mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體1mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
試劑名稱(μL) | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
95℃水浴1min后滅活的粗酶液 | 65 | |
粗酶液 | 65 | |
試劑一 | 85 | 85 |
試劑二 | 10 | 10 |
混勻,37℃準(zhǔn)確保溫20 min,置95℃水浴中5 min(蓋緊,防止水分散失),冷卻
試劑三 | 130 | 130 |
試劑四 | 10 | 10 |
混勻,室溫靜置10min,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,660nm處讀取各管吸光值。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)個(gè)一個(gè)對(duì)照管。
注意:
1、可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行5min 95℃沸水浴處理。2、試劑二如有沉淀,務(wù)必沸水浴溶解后使用。
SBE活力單位的計(jì)算
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:以波長(zhǎng)660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。
SBE活性(U/mg prot)=( A對(duì)照管-A測(cè)定管)/A對(duì)照管÷Cpr ×100
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:以波長(zhǎng)660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應(yīng)體系中每降低1%碘藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對(duì)照管-A測(cè)定管)/A對(duì)照管÷(W÷V樣總)×100
V樣總:提取液總體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
公司正在出售的產(chǎn)品:
P-cad ELISA Kit | CDCP1ELISA試劑盒 |
Antizyme Inhibitor 1(AZIN1)ELISA Kit | EB病毒IgMELISA試劑盒 |
Derlin1蛋白ELISA試劑盒 | GTPmeiNRasELISA試劑盒 |
FOS | Matrin3蛋白ELISA試劑盒 |
大鼠維生suD2(VD2)ELISA試劑盒 | 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
淀粉meiαELISA試劑盒 | 人音猬因子(SHH)檢測(cè)試劑盒elisa |
人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒 | ICE蛋白mei激活因子ELISA試劑盒 |
人組織蛋白meiG(cath-G)試劑盒ELISA | 流感嗜血桿菌PCR試劑盒 |
雞異刺線蟲PCR試劑盒 | 獸類嗜衣原體PCR檢測(cè)試劑盒 |
戈?duì)柕侠詹《?/span>RT-PCR試劑盒 | 肉毒梭狀芽孢桿菌F型外毒su基因PCR試劑盒 |
豬生殖與呼吸綜合癥病毒美洲株PCR檢測(cè)試劑盒 | 雞異刺線蟲PCR試劑盒 |
擬態(tài)弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 | TIEG1 大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1ELISA檢測(cè)試劑盒 |
C4a 人過敏毒su/補(bǔ)體片斷4ELISA檢測(cè)試劑盒 | 雞源性成分(Chicken)核suan檢測(cè)試劑盒 |
C3SP 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物ELISA檢測(cè)試劑盒 | 嗜麥芽窄食單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 | C1INH 人補(bǔ)體1抑制物抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 |