環(huán)特生物作為斑馬魚技術應企業(yè)，深度挖掘、創(chuàng)新斑馬魚技術的應用場景，將斑馬魚生物評價技術和基因編輯技術，成功應用于藥物、功能食品、化妝品和食品的原料篩選、配方研發(fā)、質控體系打造等環(huán)節(jié)，為企業(yè)提供功效評價、安全評價以及斑馬魚實驗室的建設與運營等技術咨詢服務。
在斑馬魚技術應用領域，環(huán)特生物已牽頭起草、參與發(fā)布各類標準11項，申請國家發(fā)明zhuanli60項，自主開發(fā)斑馬魚技術模型170多種。公司累計有7項斑馬魚技術成果被用于藥物CFDA注冊申報，承擔省級（含）以上科研項目7項，并聯(lián)合伙伴發(fā)表SCI及核心期刊論文100余篇。兩項成果分獲浙江省科學技術進步獎三等獎和神農(nóng)中華農(nóng)業(yè)科技獎一等獎，并作為核心技術方承擔2022年杭州“亞運果蔬類食品農(nóng)藥殘留非靶向快篩斑馬魚模型構建研究”的項目。
目前，環(huán)特生物已通過國家CNAS、CMA資質認定及AAALAC國際認證。公司已累計完成項目超5000個，建立長期合作的國內(nèi)外企業(yè)、研發(fā)機構和科研院校客戶600多家。
急性毒性試驗是了解外源化學物對機體產(chǎn)生急性毒性的根本依據(jù)，也是毒理學安全性評價的一步工作，斑馬魚早期發(fā)育階段的胚胎期是其對外界環(huán)境敏感的階段。斑馬魚的急性胚胎毒性對于化妝品的安全性評價具有重要的實際意義。
【評價原理】
將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度的受試物溶液，一定時間段后記錄斑馬魚胚胎的死亡率，確定50%試驗魚胚胎死亡的受試物濃度，用LC50表示。
【實驗方案】
配制一定濃度系列的受試物溶液，在斑馬魚發(fā)育初期（4hpf-6hpf）分別水溶加入受試物，同時設置正常對照組，孵育48h后分別觀察每組斑馬魚的發(fā)育狀況，以卵凝結、體節(jié)異常、尾部未分離等判定胚胎死亡。記錄每組斑馬魚胚胎的死亡率，繪制“濃度-死亡率”效應曲線，計算LC50值。
【結果展示】
1、斑馬魚胚胎死亡判定
圖1.斑馬魚胚胎死亡表型圖
2、LC50值：“濃度-死亡率”效應曲線
圖2. 斑馬魚胚胎“濃度-死亡率”效應曲線
【評價結論】
經(jīng)過48小時的實驗，斑馬魚胚胎隨著受試物濃度的增加逐漸出現(xiàn)死亡特征，LC50
值為31.5μg/ml。
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